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小鼠信号转导分子7（Smad7）Elisa试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中信号转导分子7（Smad7）含量。检测范围：3pmol/L-80pmol/L。小鼠信号转导分子7（Smad7）Elisa试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠信号转导分子7（Smad7）水平。用纯化的小鼠信号转导分子7（Smad7）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入信号转导分子7（Smad7），再与HRP标记的信号转导分子7（Smad7）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的信号转导分子7（Smad7）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠信号转导分子7（Smad7）浓度。　　　　小鼠信号转导分子7（Smad7）Elisa试剂盒操作步骤　　　　1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。　　　　80pmol/L　　　　5号标准品　　　　150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液　　　　40pmol/L　　　　4号标准品　　　　150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液　　　　20pmol/L　　　　3号标准品　　　　150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液　　　　10pmol/L　　　　2号标准品　　　　150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液　　　　5pmol/L　　　　1号标准品　　　　150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液　　　　2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。　　　　3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。　　　　4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用　　　　5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。　　　　6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。　　　　7.温育：操作同3。　　　　8.洗涤：操作同5。　　　　9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.　　　　10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。　　　　11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。