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　　　　　　赭曲霉素（Ochratoxin）试剂盒使用说明书使用目的：本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织（如鸡、牛肉和猪肉），鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中赭曲霉素（Ochratoxin）残留的定量检测。实验原理本试剂盒采用直接竞争ELISA方法，在微孔板包被有赭曲霉素（Ochratoxin）偶联抗原，加入赭曲霉素（Ochratoxin）标准品或样品，游离赭曲霉素（Ochratoxin）与微孔条上预包被的赭曲霉素（Ochratoxin）偶联抗原互相竞争抗赭曲霉素（Ochratoxin）抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中赭曲霉素（Ochratoxin）含量成反比，通过标准曲线计算样品中赭曲霉素（Ochratoxin）的含量。试剂盒组成1预包被的赭曲霉素（Ochratoxin）偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。2赭曲霉素（Ochratoxin）标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0μg/ml，0.01μg/ml,0.02μg/ml,0.04μg/ml,0.08μg/ml,0.16μg/ml3抗赭曲霉素（Ochratoxin）抗体酶结合物：1瓶（6ml）。4显色液A：1瓶（6ml）。5显色液B：1瓶（6ml）。6终止液：1瓶（6ml），2M硫酸。7样本稀释液：1瓶（10×,6ml），用于样品稀释用。8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。贮存1试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻2未用完的微孔板应该密封干燥保存注意事项1使用试剂盒前请仔细阅读说明书。2不要使用过期试剂盒。3试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（25±2℃），建议至少回温2小时。4标准品中含有，使用时应特别注意，操作时应带手套。5终止液中含有硫酸，使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。6不同标准品、样品所用吸头不能混用，否则会影响试验结果。7不同批号试剂盒中的试剂不得混用；不同标准品、样品所用吸头不得混用，否则会影响实验结果。8稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液，否则会影响实验结果9混合试剂时应避免起泡。样品处理程序（样品在提取过程中，要严格按说明书操作，提取过程中应准确稀释，否则会出现结果不准确，样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存）1取10g粉碎的样品，加20ml70%甲醇溶液2QL振荡3分钟3用WhatmanNo1滤纸过滤4取25l处理后的样品，加入25l样本稀释液于反应孔中（样本稀释倍数为2）酶免分析步骤1实验须知2实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温（25±2℃），时间约2小时。回温至室温（25±2℃）后再取出微孔条，多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存注：一定保证回温充分，否则影响检测的极ng确度和准确度。3使用后请立即将试剂放回2~8℃保存4请不要改变分析程序5请使用极ng确的微量移液器6操作一旦开始，请不要中断任何程序7ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序，请严格按照要求操作8为避免交叉污染，每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样9加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面10分析步骤11预先进行编号，标记B0、标准品和样品的位置，推荐进行双孔检测12取所需数量的微孔（微孔条可拆），将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存13样品稀释液（10×）、浓缩洗涤液（10×）稀释成工作液（蒸馏水或去离子水稀释）14在B0孔中加入50l0.0ng/ml标准品溶液15在各标准孔中加入50μl的标准品溶液16在各样品孔中加入50l样品溶液17在所有孔中加入50l的抗B1抗体酶结合物18轻轻晃动反应板几秒钟。1937℃温浴30min（温浴过程中不时轻拍反应板，可以减少双孔误差）20甩掉孔中液体，用洗液洗涤微孔板5次，Z后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。21反应22洗涤程序完成后，立即用微量移液器在每个微孔中先加入50l显色液A，再加50l显色液B；轻微晃动反应板使之彻底混匀2337℃温浴10min24每孔中加入50l终止液，混匀25在450nm下检测吸光度，结果在5min内读取。上海恒远生物科技有限公司是一家生物高新技术企业，主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。主要销售ELISA试剂盒，标准品对照品，血清，抗体，生物试剂、培养基等科研试剂，保证质量，价格合理，欢迎您来电咨询（021-6051734813817140470）。公司网址：http://www.gbdelisa.com