电泳仪的分类
电泳仪是应用电泳法对不同物质进行定性或定量分析,或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备,这在临床检验或实验研究中具有极其重要的意义。
电泳仪可分为两大类:临床实验室常规类,如全自动荧光/可见光双系统电泳仪、全自动醋纤膜电泳仪、全自动琼脂糖电泳仪和全自动琼脂糖电泳仪;科研为主兼做临床样本类,如双向电泳及双向电泳2液相色谱2质谱联用、GX毛细管电泳及GX毛细管电泳2质谱联用、GX毛细管芯片电泳、DNA测序系统。
1、全自动荧光/可见光双系统电泳仪
该电泳仪具有荧光/可见光双系统,在使用荧光试剂项目如肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LD)同工酶时为全自动。只需将样品、试剂、琼脂糖凝胶电泳胶片放好后,操作人员可离机完成试验并得到结果,此为全自动电泳仪。但是使用可见光项目如蛋白电泳,中途人员需返回,将电泳胶片由电泳槽放入染色系统中才可完成试验。
该电泳仪Zda优点是荧光系统全自动且灵敏度高,准确度高并且采用高压、低温系统,只需要20min即可完成电泳分析,速度非常快。
2、全自动醋纤膜电泳仪
该电泳仪为可见光单系统,使用醋纤膜电泳片。自动化程度高,只需将样品、试剂、电泳片放好,人员可离机完成试验得到结果。但是因为使用醋纤膜致使灵敏度低,无法分析尿蛋白/脑脊液蛋白,对同工酶分析效果也不理想,多半实验室只用于血清蛋白电泳分析。
3、全自动琼脂糖电泳仪
该电泳仪为可见光单系统,使用琼脂糖凝胶电泳胶片。优点为灵敏度高,可使用于低浓度蛋白检验,如尿蛋白及脑脊液蛋白。而同工酶的分离效果也相当不错。但缺点为自动化程度较差,当电泳结束和染色脱色完成后,工作人员必须将电泳片由机器中取出,对实验室较为麻烦。但是因为这类仪器所能做项目比较多,且灵敏度较高仍为许多实验室所接受。
4、全自动电泳分析系统
该电泳仪自动点样、电泳、呈色(或染色、脱色)、烘干。可用各种电泳片,包括琼脂片、醋酸片、聚丙烯酰胺等,采用可见光及荧光呈色双系统,是一种较理想的电泳仪。
5、双向电泳
双向电泳仪diyi向为等电聚焦,第二向为梯度十二烷基磺酸钠(SDS)电泳。样品经过电荷与质量两次分离后可得到分子的等电点、分子量等信息,这是目前所有电泳技术中分辨率Zgao,信息量Z多的技术,已成为分析复杂蛋白混合物的基本工具。
双向电泳仪在分离蛋白混合样品,比较差异方面有不可替代的作用。当发现新的蛋白点时,将其切下再用液相色谱分离,与质谱联用,Z后可鉴定新发现的蛋白质组分。
6、GX毛细管电泳
GX毛细管电泳仪是以弹性石英毛细管为分离通道,以高压直流电场为推动力,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的电泳分离分析方法。利用毛细管代替平板凝胶,分离效率得以提高。
GX毛细管电泳仪的应用范围从小分子、无机离子到生物大分子,甚至整个细胞,从带电粒子到中性分子都可用GX毛细管电泳方法进行分析。
目前,毛细管与质谱的接口难题已经解决,人们能利用毛细管电泳仪的GX分离能力与质谱的鉴定技术联用发挥其特殊功能,发现未知的化合物。尤其是阵列毛细管电泳仪已经问世,这将克服目前大多数商品化毛细管电泳仪只能进行单根毛细管电泳的缺陷,这种高通量的新方法将会给后基因组时代的基因分析带来革命性的变化。
7、毛细管电泳芯片
利用毛细管电泳芯片可以进行DNA长度、序列和基因分型等分析,在临床检测,尤其在遗传病的诊断中具有重要意义。现在分离DNA,是利用芯片分离荧光标记的寡核苷酸,整个分离过程在45s之内,而芯片的长度仅为318cm。
因为其可承载高电压(2300V/cm)并具有较小的样品体积,故有利于得到较好的分离效果。而用传统的毛细管电泳分离技术分离DNA样品,通常需要10~30min,电压也只能加到500V/cm。另外有人制作的用于高速DNA分离的芯片,有效长度仅为315cm,分离从70~1000bp的DNA片断,时间在120s以内。目前,高速、高通量的毛细管电泳芯片已经发展得比较完善。
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