PCR的类型
聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的Zda特点，是能将微量的DNA大幅增加。以下是PCR的类型，下面就让小编带你了解一下吧。
1.reverse PCR
两个引物之外的DNA片段是由反向的互补引物来扩增的，扩增某个已知DNA片段两边的未知序列。
在扩增未知序列之后，可以对其分析，例如可以对连接已知DNA片段的序列进行探索。被用来克隆只知道部分序列的全长cDNA，对基因文库的插入DNA进行扩增。对基因组文库进行建立。
2.不对称 PCR
目的：扩增使得特异长度的单链DNA产生。
方法：采用限制性与非限制性两种不同浓度的引物，0.01:0.5微米是它们的Z佳比例。限制性引物的量是关键。
用途：
（1）研究基因组DNA结构功能
（2）核酸序列测定的模板的制备
（3）杂交探针的制备
3.多重 PCR
在一个反应体系中，对两个以上的引物进行使用的PCR，被叫做多重PCR。多个PCR产物的产生是它的结果。其被用来对特定基因序列的存在或缺失进行检测。
4.real-time PCR
该技术的定量功能是通过在传统PCR的基础上将荧光标记探针加入来实现的，在PCR扩增过程中，每一轮循环产物的累积荧光值是通过特定设计的PCR仪器来检测的，从而能够对模板的起始浓度进行很好的推算。
探针设计的要求：
（1）和引物与模版结合的稳定程度相比，探针与模板结合的稳定程度要更加的高，所以探针的Tm值至少要高于引物的Tm值5摄氏度。
（2）防止和引物发生重叠或者杂交。
（3）GC碱基的含量应当在40％-60％，防止单核苷酸序列的重复。
（4）探针的长度应当在20-40个碱基之间，从而使结合特异性得到保证。
除此之外，实验的结果会受到探针和引物的距离或者探针的浓度或者探针与模板序列的同源性的影响。
全部评论(0条)
推荐阅读
-
- PCR的类型
- 聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。以下是PCR的类型，下面就让小编带你了解一下吧。
-
- 酒精检测仪的类型
- 用于对人体摄入酒精与否以及摄入多少程度酒精的仪器，被称为酒精检测仪。当交通jing察进行执法时，其能够作为检测工具来对饮酒司机饮酒多少进行检测，也能够用于其他场合来对人体呼出气体中的酒精含量进行检测
-
- 生物反应器的类型
- 生物反应器是指利用酶或生物体所具有的特殊功能，在体外进行生物化学反应的装置系统，它是生物反应过程中的关键设备。生物反应器具有成本低、设备简单、效率高、产品作用效果显著、减少工业污染等优点。
-
- PCR的常见问题
- 聚合酶链式反应简称PCR(又称：多聚酶链式反应) PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，下面就让小编为大家介绍一下PCR的常见问题以及yi疗应用。
-
- PCR的反应控制
- PCR技术是模拟体内DNA的天然复制过程，在体外扩增DNA分子的一种分子生物学技术，主要用于扩增位于两段已知序列之间的DNA区段。
-
- 平衡机类型
- 平衡机是用来对转子不平衡进行测定的仪器，平衡机属于硬支承平衡机，摆架具有非常大的刚度。采用动平衡机测量结果校正转子的不平衡量，减少作用于轴承上的振动或者转子旋转时产生的振动到被允许的范围。
-
- 平衡机类型
- 平衡机是用来对转子不平衡进行测定的仪器，平衡机属于硬支承平衡机，摆架具有非常大的刚度。
-
- 空气消毒机类型
- 对滤过、净化、杀菌等原理加以利用来对空气进行消毒的仪器，即为空气消毒机。空气消毒机不仅能够将细菌、病毒、霉菌、孢子等杀灭，而且其中一些机型还可以将室内空气中的甲醛，苯酚等有机污染气体去除。
-
- 红外光谱仪类型
- 红外光谱仪的应用为各个领域带来了不少的影响和技术支持的同时加快了各行业的研究效率，因此红外光谱仪的保养和保存也变得越来越重要。
-
- PCR方法
- PCR是聚合酶链式反应的简称，是一种酶促化学反应，可以在试管里将待测的目的基因在很短的时间内扩增五十万倍乃至上百万倍，大大提高了基因诊断的灵敏度，降低了分析的难度。
-
- PCR阴性
- 对特定的DNA片段起到放大扩增作用的一种分子生物学技术，被称为聚合酶链式反应。其可以被当作生物体外的特殊DNA复制，能够大幅增加微量的DNA。下面就让小编带你了解一下PCR反应阴性的原因。
-
- PCR原理
- 对特定的DNA片段起到放大扩增作用的一种分子生物学技术，被称为聚合酶链式反应。其可以被当作生物体外的特殊DNA复制，能够大幅增加微量的DNA。
-
- 酒精检测仪的基本类型
- 酒精检测仪是用来检测人体是否摄入酒精及摄入酒精多少程度的仪器。它可以作为交通jing察执法时检测饮酒司机饮酒多少的检测工具，以有效减少重大交通事故的发生；也可以用在其他场合检测人体呼出气体中的酒精含量
-
- 光调制器的原理|类型
- 光调制器是通过电压或电场的变化最终调控输出光的折射率、吸收率、振幅或相位的器件。它所依据的基本理论是各种不同形式的电光效应、声光效应、磁光效应、量子阱Stark效应、载流子色散效应等。
-
- 光隔离器的结构类型
- 光隔离器是光通信系统中不可缺少的无源器件，楔形光隔离器插入损耗小，隔离度高，器件体积小，是目前主要应用的光隔离器结构，随着高速光通信发展的要求，隔离度高且无偏振模色散的两级光隔离器结构将越来越受重视。
-
- 荧光显微镜的类型|用途
- 荧光显微镜是光学显微镜的一种，是免疫荧光细胞化学的基本工具。以紫外线为光源，用以照射被检物体，使之发出荧光，然后观察物体的形状及其所在位置。用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。
-
- 血气分析仪的常见类型
- 血气分析仪生产厂家多、型号很多，血气分析仪结构一般包括电极、进样室、CO2空气混合器、放大器元件、数字运算显示屏和打印机等部件。可对血液样本进行自动化分析。
-
- 生物安全柜的类型|选择
- 生物安全柜广泛应用在医疗卫生、疾病预防与控制、食品卫生、生物制药、环境监测以及各类生物实验室等领域，是保障生物安全和环境安全的重要基础。
-
- 普通PCR仪和荧光定量PCR仪的操作规程
- 聚合酶链式反应是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，通过高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应形成一个周期，目的DNA迅速扩增，其具有节约时间，操作简单，高灵敏度，强特异性等特点。
-
- 荧光定量PCR的注意事项
- 将荧光基团加入到PCR反应体系中，通过不断累积荧光信号从而使对PCR全程的实时监测实现，再根据标准曲线定量分析未知模板的方法，即是荧光定量PCR技术。
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布，观点仅代表作者本人，不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们立即通知作者，并马上删除。
②凡本网注明"来源：仪器网"的所有作品，版权均属于仪器网，转载时须经本网同意，并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品来源，并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱：hezou_yiqi
沪公网安备 31011502008050号
参与评论
登录后参与评论