多肽合成常见的问题（三）
1．不同纯度级别多肽的使用领域是什么？
答：由于多肽的纯度级别不同，其的使用领域也存在差异。
（1）酶底物定性研究、体外生物活性分析，免疫封闭、磷酸化研究、亲和层析，单抗制备等研究
可以使用研究级80%以上纯度的多肽。
（2）细胞体内外活性分析，定量分析等大多数研究均可以使用90%以上的纯度，纯度达到95%以上就能够用于NMR研究。
（3）粗品和脱盐级别的纯度与多肽的长度相关。Fmoc固相多肽合成具有超过95%的氨基酸的偶连效率。
（4）免疫抗体为多肽的一个非常重要的用途，免疫的要求在通常情况下需要达到疫级65-75%左右纯度。若纯度为90-95%的多肽可以使抗体产生，那么65-75%纯度的多肽通常也不会失败。纯度高固然很好，然而需要花费相对比较长的时间以及比较高的代价，同样，70%左右的纯度就能够满足Elias测定抗体效价。
2．制备多肽抗体，常用的载体有那些？如何选择？
答：多肽具有很小的分子量，比较差的免疫应答效果，需要和载体偶连来使免疫源性得以提高。通常将高分量的蛋白质作为载体。KLH(铜蓝蛋白)，BSA,OVA等为常用的载体，KLH为shou选的载体。在ELISA测定多肽抗体效价时，一些多肽需要与BSA等偶连后再包板，直接包板比较困难。
3．关于AntigenGrade多肽必须在在多肽的一端增加Cysteine吗？
答：不一定，氨基酸组成同偶连的方式与偶连的活化剂有关联。
MBS:S-S是由Cys的基团载体中其他SH连接而形成，若序列中没有Cys，则应当对Cys基团进行添加，Z好是在N端添加。
EDC:通过C端COOH连接，通常要求序列中没有anamidatedC-terminus或者Glu(E)以及Asp(D)。
Act.EDCMethod:通过N端的氨基偶连，要求序列中没有乙酰化N端或者没有Lys(K)。
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