培养基分装仪细胞培养基的介绍
由不同营养物质组合配制而成,为微生物、植物或动物(或组织)的生长繁殖提供营养的营养基质,被称为培养基。通常,碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质都属于培养基的成分。6.因为培养基所需的配置原料以及使用的要求的不一样,贮存保管方面也稍有差异。通常,培养基在受热、吸潮后,容易受到细菌的污染或者变质分解。所以培养基必须保管在防潮、避光、阴凉的地方。下面让小编带你了解一下细胞培养基的基本介绍。
合成培养基
1951年,供动物细胞体外生长的人工合成培养基(MEM)被厄尔开发出来了,合成培养基具有相当多的种类,合成培养基成分已知,方便控制实验的条件。然而尚无法用已知的化学成分所替代天然培养基的未知成分,所以,细胞培养中,还必须将一定量的天然培养基成分加入到使用的基础合成培养基内,从而使合成培养基的不足得到弥补。将小牛血清加入是Z普遍的做法。
动物血清有着非常复杂的成分,各种生物大小分子混合在一起,至今尚未搞清楚,有些成分,血清有利于细胞生长,然而会为后期对培养产物的分离、提纯以及检测带来麻烦。除此以外,高质量的动物血清来源有限,成本昂贵,对它的大量使用起到了限制的作用。无血清培养基不加动物血清,将细胞生长有效因子,激素等加入到基础培养基中。
动物细胞培养必需的溶液
抗生素溶液:1)制霉菌素:浓度25U/ml,小瓶分装,每瓶一次用完。2)青、链霉素,每毫升培养液含100U青霉素和100ug链霉素。3)卡那霉素:终浓度为50ug/ml培养液。
细胞消化液:胶原酶溶液、EDTA溶液、胰蛋白酶溶液。
PH调整液:HEPES溶液(二羟乙基哌嗪乙烷磺酸)与7.4%、5.6%、3.7%的NaHCO3溶液。
平衡盐水(BSS):常用的BSS基础溶液为Earle液与Hanks液。
细胞合成蛋白质的基本成分是氨基酸,有12种氨基酸是细胞本身不合成的,必须由培养液提供。这些氨基酸包括类胰岛素生长因子(IGFl、IGF2)、增殖刺激因子(MSA)、成纤维细胞生长因子、表皮生长因子等多种生长因子、生长激素以及有胰岛素等。
另外两种较好的天然培养基成分是胶原与水解乳蛋白。胶原是从动物中提取的,其能够对细胞表面特性有所改善从而对其附着生长具有促进的作用。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解产物,富含氨基酸。通常配制成0.5%溶液,微酸性。
牛血清和马血清是Z常使用的动物血清,牛血清又包括犊牛血清与胎牛血清,其中胎牛血清来源少,价格昂贵。犊牛血清要求刚产下尚未哺乳的小牛,因为哺乳后的小牛血清中可能含有更复杂的成分。蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等为血清中已知的主要成分。
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