拉曼光谱仪的原理及特点
拉曼光谱仪通过分子振动引起分子极化率的变化,产生拉曼光谱。拉曼光谱不是观察光的吸收,而是观察光的非弹性散射。非弹性散射光很弱,过去较难观测。激光拉曼光谱仪的出现使灵敏度和分辨力大大提高,应用日益广泛。
拉曼光谱仪的进展
1928年,印度物理学家拉曼首次发现曼散射效应,荣获1930年的诺贝尔物理学奖。
1928-1940年,拉曼光谱仪为研究分子结构的主要手段。
1960年以后,激光技术的发展使拉曼技术得以复兴。由于激光束的高亮度、方向性和偏振性等优点,成为拉曼光谱仪的理想光源。随探测技术的改进和对被测样品要求的降低,目前在物理、化学、医药、工业等各个领域拉曼光谱得到了广泛的应用,越来越受研究者的重视。
拉曼光谱仪的原理
当光线照射到分子并且和分子中的电子云及分子键结产生相互作用,就会发生拉曼效应。对于自发拉曼效应,光子将分子从基态激发到一个虚拟的能量状态。当激发态的分子放出一个光子后并返回到一个不同于基态的旋转或振动状态。在基态与新状态间的能量差会使得释放光子的频率与激发光线的波长不同。
如果Z终振动状态的分子比初始状态时能量高,所激发出来的光子频率则较低,以确保系统的总能量守衡。这一个频率的改变被名为Stokes shift。如果Z终振动状态的分子比初始状态时能量低,所激发出来的光子频率则较高,这一个频率的改变被名为Anti-Stokes shift。拉曼散射是由于能量透过光子和分子之间的相互作用而传递,就是一个非弹性散射的例子。
关于振动的配位,分子极化电位的改变或称电子云的改变量,是分子拉曼效应必定的结果。极化率的变化量将决定拉曼散射强度。该模式频率的改变是由样品的旋转和振动状态决定。
拉曼光谱仪的优越性
拉曼光谱仪提供快速、简单、可重复、且更重要的是无损伤的定性定量分析,它无需样品准备,样品可直接通过光纤探头或者通过玻璃、石英、和光纤测量。此外:
1、由于水的拉曼散射很微弱,拉曼光谱仪是研究水溶液中的生物样品和化合物的理想工具。
2、拉曼一次可以同时覆盖50-4000波数的区间,可对有机物及无机物进行分析。相反,若让红外光谱覆盖相同的区间则必须改变光栅、光束分离器、滤波器和检测器。
3、拉曼光谱仪谱峰清晰尖锐,更适合定量研究、数据库搜索、以及运用差异分析进行定性研究。在化学结构分析中,独立的拉曼区间的强度可以和功能集团的数量相关。
4、因为激光束的直径在它的聚焦部位通常只有0.2-2毫米,拉曼光谱仪只需要少量的样品就可以得到。这是拉曼光谱相对常规红外光谱一个很大的优势。而且,拉曼显微镜物镜可将激光束进一步聚焦至20微米甚至更小,可分析更小面积的样品。
5、共振拉曼效应可以用来有选择性地增强大生物分子特个发色基团的振动,这些发色基团的拉曼光强能被选择性地增强1000到10000倍。
拉曼光谱仪研究意义
由于拉曼光谱仪具有制样简单、水的干扰少、拉曼光谱分辨率较高等特点,故其可以广泛应用于有机物、无机物以及生物样品的应用分析中。
拉曼光谱仪己广泛应用于医药、文物、宝石鉴定和法庭科学等领域。对文物样品的无损分析研究。使文物的鉴定、年代的测定及文物的恢复和保存的方法更安全可靠;对爆 炸物、毒品、墨迹等的痕迹无损检测为法庭提供科学证据的有力手段:对宝石的光谱分析研究对认识各地宝石中的包含物差异性。并使宝石的鉴别与评价有了科学依据。
近年来,拉曼光谱仪在细胞和组织的癌变方面的检测也取得了很大的进展,随着分析方法完善和研究病例的增多以及对于病变组织差异性的规律性认识深化。拉曼光谱发展成诊断肿瘤方法的可行性将得到确认.总之,随着激光技术的发展和检测装置的改进。拉曼光谱仪在当代工业生产和科学研究中必将得到越来越广泛的应用。
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