PCR反应所需要的时间的影响因素
模块升温和降温时间、模块与PCR管内温度平衡时间、延伸时间以及循环次数这四个因素决定了在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间。
1、延伸时间
PCR产物的长度和DNA聚合酶的合成速度会对延伸时间产生影响。若PCR产物长度不足100bp时，则可以考虑将延伸时间变为0。常用的方法还有采用高速的DNA聚合酶，但是，高速的DNA聚合酶并不是对所有PCR实验都适用。
2、循环次数
模板量及检测要求会对循环次数产生影响。整合高速DNA聚合酶、超薄管（或特殊贴附技术）以及快速PCR仪使得CR反应在较短的时间内完成，就是快速PCR技术
3、模块升温和降温度时间
升降温速度通常会在PCR仪上被标明，然而，大多数PCR仪标的是Zda变温速度，即是瞬间达到的速度。仅有很少的PCR仪标的是和实验相关的平均升降温速度
4.模块与PCR管内温度平衡时间
由于铝块的导热能力要强于塑料和水许多，所以当模块温度达到后，PCR管内的温度还远没有达到，使二者达到平衡需要一定的时间。想要使这一时间减少，有以下四种方法：
（1）使模块温度过冲，在管内温度快达到时降到目标温度，然而如果过冲的温度太高会导致实际温度过冲，会对PCR反应结果产生影响。
（2）使PCR反应液的体积减少，然而若体积变小则会降低PCR反应的可靠性。
（3）使PCR管的厚度降低，然而若太薄则强度不够。
（4）使PCR管与模块贴附程度增加。
全部评论(0条)
推荐阅读
-
- PCR反应所需要的时间的影响因素
- 模块升温和降温时间、模块与PCR管内温度平衡时间、延伸时间以及循环次数这四个因素决定了在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间。
-
- PCR的反应特点
- PCR技术是模拟体内DNA的天然复制过程，在体外扩增DNA分子的一种分子生物学技术，主要用于扩增位于两段已知序列之间的DNA区段。
-
- PCR的反应流程
- PCR是聚合酶链式反应的简称，是一种酶促化学反应，可以在试管里将待测的目的基因在很短的时间内扩增五十万倍乃至上百万倍，大大提高了基因诊断的灵敏度，降低了分析的难度。
-
- 影响化学发光免疫测定的因素
- 化学发光免疫分析是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。
-
- 水分活度的影响因素
- 主要用于反应食品平衡状态下的微生物能利用的或者能参与化学反应的有效水分、产品稳定性和微生物繁殖能力的仪器，即为水分活度仪。
-
- 影响微波萃取的因素
- 微波萃取又被叫做微波辅助提取，指的是在微波反应器中采用适当的溶剂将各种化学成分从植物 、矿物 、动物组织等中提取出来的技术和方法。频率在300兆赫-300吉赫的范围内的电磁波，即为微波。
-
- 影响电泳的因素
- 利用在电场作用下带电粒子向极性相反的电极方向移动的现象来实现多组分物质分离、分析的仪器设备，称为电泳仪。
-
- 微波萃取的影响因素
- 微波萃取又被叫做微波辅助提取，指的是在微波反应器中采用适当的溶剂将各种化学成分从植物 、矿物 、动物组织等中提取出来的技术和方法。频率在300兆赫-300吉赫的范围内的电磁波，即为微波。
-
- 细胞融合的影响因素
- 在自发或人工诱导下，两个细胞或原生质体融合，使得一个杂种细胞形成，即是细胞融合。细胞融合使得异核体形成、通过细胞有丝分裂异核体进行核融合、zui终使得单核的杂种细胞形成为细胞融合的基本过程。
-
- PCR反应五要素
- 对特定的DNA片段起到放大扩增作用的一种分子生物学技术，被称为聚合酶链式反应。其可以被当作生物体外的特殊DNA复制，能够大幅增加微量的DNA
-
- 继电器可靠性的影响因素
- 继电器为一种电控制器件，为输入量（激励量）的变化达到规定要求时，在电气输出电路中使被控量发生预定的阶跃变化的一种电器。
-
- 粉末流动仪的影响因素
- 对粉末流动性进行测定的仪器，叫做粉末流动仪，霍尔流速计为它的又一个名称。构成粉末流动仪的主要部件包括接粉器、底座以及漏斗等。在出厂前和用户使用前均需使用标准物质来对漏斗进行校正，进行校正系数的测定。
-
- 摩擦磨损试验机的影响因素
- 在实际的摩擦磨损现象发生过程中，影响摩擦磨损试验效果的主要因素有温度、载荷、时间、速度、接触形式、环境气氛、表面性质、运动形式、润滑状态等。
-
- 影响毛细管电泳仪的分离因素
- 影响毛细管电泳仪的分离因素包括缓冲试剂的选择、缓冲体系pH、分离电压、温度、添加剂、进样。。下面具体了解一下影响毛细管电泳仪的分离的因素有哪些？
-
- 颗粒计数器校准的影响因素
- 校准颗粒计数器，存在很多影响校准准确性的因素及其注意事项，本文主要从设备状态、取样体积、工作流速、样品处理及校准过程遇到问题的解决方法等相关方面进行分析论述。
-
- 火焰光度计灵敏度的影响因素
- 火焰光度计，是指以发射光谱法为基本原理的一种分析仪器。火焰光度计灵敏度是检验一台火焰光度计性能的重要指标，同时也对样品测试的准确度、稳定性起到举足轻重的作用。
-
- 杯突试验机影响因素
- 机电一体化设计为杯突试验机所采用，其具有大方且整洁的外观，且进行金属薄板和带材工艺性能试验的精密设备。
-
- 离心机的分离效果的影响因素
- 影响离心机的分离效果的因素主要包括两个方面，一类为不可以改变的设计参数；另一类为可以改变的操作参数。下面一一为大家详细介绍影响离心机的分离效果的各个因素具体有哪些？
-
- 乳化机乳化效率的影响因素
- 乳化机即为利用连接发动机的均质头的高速旋转，来剪切，分散，撞击物料。如此，物料即会变得更加的细腻，对油水相融起到促进作用。
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布，观点仅代表作者本人，不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们立即通知作者，并马上删除。
②凡本网注明"来源：仪器网"的所有作品，版权均属于仪器网，转载时须经本网同意，并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品来源，并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱：hezou_yiqi
沪公网安备 31011502008050号
参与评论
登录后参与评论