移液工作站在基于细胞水平高通量药物筛选中的应用
高通量筛选(high throughput screening,HTS)是一种为寻找新药先导物而对大量样品进行药理活性评价分析的技术手段。HTS技术体系综合应用多种技术,实现了药物筛选的快速、高效、微量化、自动化和规模化,是新药研究和开发的重要技术方法。
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高通量药物筛选整个过程需要大量化合物的药理活性进行横向比较。细胞水平的药物筛选是更接近生理条件的一种药物筛选模型,它以整体细胞作为药物作用的对象,观察药物对整体细胞的影响,能充分反映出药物对细胞和细胞器的综合作用,因而筛选的准确率更高。
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基于细胞整体水平的药物筛选,不仅可以考察药物的作用效果,明确作用靶点,还可以通过细胞的增殖、衰亡以及胞内外环境的变化特征得到药物在体内的转运、保留和代谢等动力学参数,具有微量、准确、稳定的特点,是目前使用较为成熟和广泛的一类方法。
在漫长的药物筛选周期中,往往需要培养基分配、细胞悬液转移、药物梯度稀释及不同浓度药物分至细胞培养体系、各种检测试剂转移处理等大量反复且繁琐的移液操作。体积跨度大、工作量大且对重复性要求高,移液步骤失误是造成高通量药物筛选试验失败的主要原因之一。得益于自动化移液工作站的高速发展,该问题有了更优的解决方案。
准确度和精确度是用于评价移液器性能的指标,对测量点的多次实测值取平均值,该平均值与目标值的偏离程度,称为准确度;测量点的多次实测值相互之间的偏离程度,称为精确度。其中精确度是取决于移液器的物理结构稳定性,无法或极难调整,数值越接近于0准确度越好,精确度越高。
Au-mate 96全自动移液工作站不同
规格移液模块准确度、精确度实测值
移液枪规格:1-20μL
测试点 | 测试次数 | 均值 | 准确度 | 精确度 | ||||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | ||||
1µL | 94.44 | 96.54 | 96.84 | 97.76 | 92.34 | 95.58 | -0.43% | 2.28% |
2µL | 189.40 | 189.18 | 188.08 | 190.26 | 190.06 | 189.40 | -1.36% | 0.45% |
10µL | 960.10 | 960.90 | 959.40 | 957.90 | 957.80 | 959.22 | -0.08% | 0.14% |
20µL | 1903.00 | 1909.24 | 1900.30 | 1900.40 | 1902.02 | 1902.99 | -0.89% | 0.19% |
移液枪规格:5-200μL
测试点 | 测试次数 | 均值 | 准确度 | 精确度 | ||||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | ||||
5µL | 475.00 | 476.60 | 477.40 | 475.30 | 476.80 | 476.22 | -0.79% | 0.22% |
20µL | 1914.16 | 1923.20 | 1920.50 | 1918.40 | 1920.80 | 1919.41 | -0.03% | 0.18% |
100µL | 9574.44 | 9564.70 | 9568.60 | 9570.50 | 9566.40 | 9568.93 | -0.32% | 0.04% |
200µL | 19160.70 | 19147.50 | 19168.60 | 19159.40 | 19152.80 | 19157.80 | -0.22% | 0.04% |
移液枪规格:100-1000μL
测试点 | 测试次数 | 均值 | 准确度 | 精确度 | ||||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | ||||
100µL | 9624.80 | 9602.54 | 9590.00 | 9598.22 | 9610.98 | 9605.31 | 0.06% | 0.14% |
500µL | 47695.18 | 47625.84 | 47712.44 | 47702.14 | 47688.50 | 47684.82 | -0.66% | 0.07% |
1000µL | 95647.70 | 95622.10 | 95656.30 | 95612.40 | 95672.20 | 95642.14 | -0.37% | 0.03% |
注:测量值为96道枪实测所得
奥盛自主研发的Au-mate 96系列全自动移液工作站可实现高效、精 准的移液操作,包括96/384细胞培养板的单列、多列、整板液体转移,板内、板间梯度稀释,吹打混合、磁珠分离等功能。程序编辑全流程自动化运行助您在基于细胞水平的高通量药物筛选试验更高效、更稳定。
参考文献
1.高通量筛选技术在药物发现中的应用进展--中国药学杂志第4期
2.基于细胞的药物筛选技术--北京安必奇生物
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