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生物安全有多重要?小 E 已唠唠叨叨了很多防污染小知识,比如疫情期间,☞实验汪该如何保护自己;还有在实验室中,☞怎样规避掉污染雷区;甚至,小E还蹭了☞“三件套、五还要”的热度 ,为培养细胞的实验汪总结了小贴士,方便记忆。
相信学习了以上这些知识的 E 粉儿们,防污染这块肯定拿捏得死死的。今天小 E 又要来介绍新的知识点啦!看看在 PCR 实验中,需要注意些什么。
PCR 实验 & PCR 污染的隐匿性
作为现代分子生物学实验工作的基础之一,PCR(Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应,是上个世纪 70 年代早期提出设想,并在 80 年代由 Kary Mullis 及其在 Cetus 公司的同事真正付诸实践的技术。
如今 PCR 已经是一项几乎所有生物实验室都必备的技术了。但在 PCR 实验过程中由于实验样品、实验环境的差异,大家还是会遇到各种各样的问题,其中 PCR 实验污染是一个避不开的话题。
实验室污染
提到实验室污染,大家往往第 一反应是实验室中由于管理或者操作不当,造成了有害物质在实验室内外扩散或者直接侵染了实验室人员。相关的管理与预防措施可以参考世卫组织(WHO)的实验室生物安全手册。
今天小 E 主要来谈谈 PCR 实验中由于会产生巨量核酸而引起的污染情况,这一类污染不一定会对实验人员产生伤害,但是会对实验结果产生严重的干扰和误导,甚至在医学检验类实验室中产生对病原和病情的误判情况。
规范化的分子实验室
通常需要对操作区域进行仔细划分,主要原因是为了避免不同实验产生对样品、试剂以及环境的交叉污染。
部分分子实验室
更有部分分子实验室还会对不同功能的区域划分出独立的房间,通过带紫外灯的传递小窗实现不同功能房间的物品传递,进一步防止交叉污染。
PCR 实验的污染来源
对于 PCR 实验,污染主要是指含有 DNA 的微小液体颗粒的气溶胶污染,而这些污染又是从何而来呢?
排除人为因素(错误操作等)和操作人员本身(头发、皮屑等)因素,在样品制备、PCR 扩增和 PCR 前/后的实验操作中,都可能会引起气溶胶污染,从而直接或间接影响后续的实验结果。
按照产生方式,可分为:
▲ 移液器引起的污染
▲ PCR 仪引起的污染
▲ PCR 产物分析引起的污染
气溶胶污染的来源(Theodore E.Mifflin,2007)
如何应对 PCR 实验中的污染
小 E 已经为大家准备了 PCR 实验宝典,宝典中为大家归纳总结了
①PCR 历史
②原理
③条件优化
④污染预防
⑤应对的各项 PCR 实验室必备技能
点击领取 PCR 实验宝典
https://eppendorf.juplus.cn/pageTurnings/index.html?id=236
最 后小 E 还有三道简单的送分题题留给评论区的 E 粉儿们~回答正确即有机会赢取降温好礼一份
友情提示:部分答案可在 PCR 宝典中找到
Q1
以下哪几张图是 PCR 仪?(多选)
A
B
C
D
Q2
Eppendorf 首 款 PCR 仪推出的年份是?
A、1988 年
B、1990 年
C、1992 年
D、1994 年
Q3
UNG 酶体系在 PCR 实验中的作用是?
A、提高扩增效率
B、改变变性温度
C、指示 PCR 产物量
D、预防/消除实验污染
活 动 规 则
在评论区写下你的答案,按照时间顺序,回答全部正确的前 20 名即可获得小 E 送出的强 力夏日电风扇一份!为你的炎炎夏日降降温~
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