实测有效!病毒颗粒浓度有效时间长达120小时
在基因疗法和疫苗生产中,经常会用到大量病毒颗粒。在病毒和蛋白质的下游纯化过程中又会使用各种方法,包括过滤、离子交换色谱和梯度离心等。
这些技术都需要使用高品质的实验室塑料容器来处理和保存病毒样本。
在疫苗生产和纯化过程中,病毒样本浓度不高,因此,实验室塑料容器对样本的非特异性吸附往往会造成重大问题,导致样本损失。而优质的低蛋白吸附离心管或许可以解决这一问题。
ScienceDirect® 是领先的同行评审文献平台,可帮助到广大学者的研究。该平台于 2007 年 2 月 16 日出版了《Journal of Chromatography A》第 1142 卷第 1 期,其中详细介绍了美国纽瓦克市特拉华大学化学工程系 E.I. Trilisky 和 A.M. Lenhoff 两人关于“Sorption processes in Ion-exchange chromatography of viruses”的研究。
相关实验
作者使用离子交换纯化法测试了来自不同制造商的九种离心管。实验清楚表明,只有 Eppendorf 低蛋白吸附离心管能让病毒颗粒的浓度在整个 120 小时的保存时间内保持稳定。在所有其他受试离心管中,样本浓度均下降到初始浓度的 60% 乃至 18%(图 1)。
图 1:不同离心管中随时间变化的病毒样本损失(20mM HEPES,150 mM NaCI,pH 7.8:Ad5 初始浓度约为 6 x1010 p/mL ≈ 0.02 g/L)。
▲ 测试离心管:Eppendorf 低蛋白吸附离心管和8种离心管竞品。内容取自于[1],第 7 页,版权所有 2007 Elsevier B.V.
值得注意的是,实验结果还表明,在使用各种缓冲液系统(HEPES 缓冲液、磷酸盐缓冲液、Tris 缓冲液)且离子强度范围较宽的条件下(NaCl 浓度在 0 到 3 mol/L 之间),储存在 Eppendorf 低蛋白吸附离心管中的病毒样本浓度也能保持稳定(图 2,内容取自于[1])。
图 2:与容器结合导致的病毒损失随离子强度的变化关系(0.5 mL 低吸附离心管,20 mM HEPES,pH 7.8,每支离心管 400 μL 溶液,初始浓度为 1.3 x 1010 p/mL ≈ 0.04 g/L,数据在 24 小时和 48 小时后采集,两组时间点之间无显著差异)。
内容取自于[1],第 7 页,版权所有 2007 Elsevier B.V.
作者得出结论,在所有测试离心管中,只有 Eppendorf 低蛋白吸附离心管管壁不会结合病毒颗粒,因而推荐用于病毒样本的采集和保存。
▲ 想要了解有关上述文章的更多信息:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17240385/
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参考文献
[1] E I Trilisky, A M Lenhoff , Sorption processes in ion-exchange chromatography of viruses. J Chromatogr A. 2007 Feb 16;1142(1): 2-12
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