最新文章一网打尽 | 安捷伦2D-LC液相色谱中药/天然产物应用快报(上篇)
安捷伦始终致力于 2D-LC 等新技术的投入和研发,不断创造出更为先进的色谱分离技术并不断改写历史。选择安捷伦 2D-LC,让您的实验室获得分离能力更强、更灵活、更易用的二维液相色谱分离方案。
安捷伦 2D-LC 主要提供两种不同的分离模式:中心切割 2D-LC和全二维液相(LCxLC)。其中,中心切割 2D-LC 又包含(多)中心切割(MHC)和高分辨率采样(HiRes)模式:
(多)中心切割(MHC)
将一个或多个感兴趣的峰贮存,随后在第二维中进一步分析。
高分辨率采样(HiRes)
将某个感兴趣的峰进行多次切割并比较不同位置的结果,例如用于获得可靠的定量结果。
全二维液相(LCxLC)
将全部一维分离的流出物以等量的方式切割并全部进入第二维分析,从而获得更全面的结果。
安捷伦 2D-LC 解决方案可帮助您分离共洗脱化合物并实现最 高的峰容量。在需要提高分离度时,可以利用中心切割和高分辨率采样,或利用全二维液相色谱分离复杂混合物。使用二维液相色谱使待测物与不挥发的缓冲盐分离且与 MS 检测兼容:
2D-LC的主要应用优势
中药/天然产物因其自身的复杂特性,在分离测定时,要求仪器不仅要能实现对中药及天然产物的简单化学成分及组成分析,还要实现对同品种中药的化学聚类及溯源分析、正 品与混淆品的特征差异性分析以及复 方组成及代谢分析。而二维液相色谱技术在中药质量研究中,实现了新型液相色谱技术的突破性应用,全面有效地提升了上述中药/天然产物分析的水平。
安捷伦二维液相色谱解决方案,以性能优异的液相色谱硬件、二维控制/采集软件为基础,全面实现全二维液相色谱(2D-LC)、(多)中心切割二维液相色谱分析和高分辨率采样分析;同时,安捷伦二维液相色谱系统也全面兼容安捷伦质谱系统,质谱系统软件可完全控制二维系统并实现全部二维功能。这使二维系统不仅可在需要时提高分离度解决复杂的分离问题,也可以同时获得质谱相关定性定量结果,实现分离和定性一次完成,符合中药/天然产物快速、准确分析的要求。
Eugene HJ Nell, André de Villiers 在 2022 年发表于《Journal of Chromatography A》的文章《Using multiple heart-cutting valves and stop-flow operation to enable variable second dimension gradient times in online comprehensive two-dimensional liquid chromatography》中,采用了安捷伦 1290 Infinity Ⅱ 的全二维液相(LC × LC),构建了 HILIC×RP-LC 的分离体系,对可可、葡萄籽和白坚木提取物中的浓缩类单宁(原花青素)进行了分离。全二维液相(LC × LC)比传统方法获得了更高的峰容量和分离效果,特别是对于低含量的中等分子量原花青素低聚物的分离呈现出显著的优势。
葡萄籽提取物的 LC×LC(HILIC×RP)谱图
Yan Chen, Xiao-Ting Zhen 等在 2021 年发表于《Microchemical Journal》的文章《Chemoinformatics based comprehensive two-dimensional liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry approach to chemically distinguish Chrysanthemum species》中,使用安捷伦 1290/1290II Infinity 全二维(LC×LC)2D-LC 系统与 Q-TOF/MS 联用,对一维及二维的色谱柱选择、流速和梯度程序进行优化,获得了最 高峰容量,并建立了不同品种菊花样品中 19 种分析物的含量测定方法并完成测定。基于成分与含量的数据,进行主成分分析(PCA)、偏最小二乘判别分析(PLS-DA)和层次聚类分析(HCA),实现对不同品种菊花的鉴定和质量控制。
实验流程图
对第二维流速进行优化:(a) 1.5 mL/min; (b) 2.0 mL/min; (c) 2.5 mL/min.
26 个菊花样本的 PLS-DA 打分图
Xin Dong, Juan Yang 等在 2020 年发表于《Microchemical Journal》的文章《Microextraction assisted multiple heart-cutting and comprehensive two- dimensional liquid chromatography hyphenated to Q-TOF/MS for the determination of multiclass compounds from Dendrobium species》中,使用了安捷伦 Infinity 1290/1260 2D-LC 系统,分别采用多中心切割(MHC)和全二维(LC × LC)模式与 Q-TOF/MS 联用,完成了对石斛属植物提取物中的痕量化合物分析和测定的挑战性工作,对黄酮类、酸类、酚类、联苄类、生物碱类、醇类和苷类等 31 种化合物进行了表征和分离。
分析方法流程图
二维梯度和谱图的优化
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