Gilson实验室移液指南，请查收！

来源：吉尔森实验仪器（上海）有限公司分类：商机 2023-03-30 11:05:41 66阅读次数

采用正确的移液工具和操作技巧提高样品完整性

无论何种应用，进行科学研究时，样品完整性都至关重要。缺乏样品完整性，实验多变，数据结论不可靠，并可能造成对实验人员潜在的健康风险。缺乏样品完整性还可能意味着实验时间和成本的增加，从而对实验室通量和预算产生负面影响。因此，为确保实验结果准确、可靠，为自信、高效、安全地执行的工作流程，实验室必须优先考虑样品的完整性。

确保样品完整性，必须隔绝样品污染。样品污染会发生在实验进行的各个阶段，包括样本收集、运输、分析和储存。然而，最常见的两个风险因素是使用不合适的移液工具和采取错误的移液操作。

在本文中，我们将探讨移液过程中导致样品污染的来源，并展示正确的移液工具和移液操作是如何帮助实验者最大限度地提高样品完整性，从而获得实验的成功。

移液过程中的污染物

移液过程中样品污染的主要来源是气溶胶，即悬浮在气体中的固体颗粒或液滴悬浮液。虽然一系列实验室活动均可能产生气溶胶，但使用不适当的移液器和不恰当的移液操作可能是最重要的。

科学家在实验室中会遇到不同类型的污染物，主要分为生物污染物和化学污染物（表 1）。依据实验应用的不同，不同类型污染物形成的风险和影响也具有很大差异。例如，DNase污染是聚合酶链反应（PCR）过程中的一个重要问题，这可能导致错误的结果并严重影响目标基因的产量。

污染类型	污染物示例
生物污染物	微生物、DNA、RNA、DNase、RNase、内毒素等
化学污染物	放射性化合物、酸/碱、金属元素、腐蚀性物质、塑料耗材浸出物等

表1：实验室中可能遇到的不同类型污染物

移液过程中的主要污染途径

在移液过程中，实验人员需要重视三种主要的潜在污染途径：

“样品至移液器”污染

在“样品至移液器”污染中，样品（或样品气溶胶）进入移液器主体（图1）。

图1：形成的样品气溶胶进入移液器未受保护的气腔部分，发生“样品至移液器”污染。

当移液器处于非垂直状态时，样品可能从吸头倒流进入移液器内部，从而发生“样品至移液器”污染。快速或无序分液时，形成的气溶胶或样品飞溅也会导致“样品至移液器”污染。在处理挥发性样品时，气溶胶形成的可能性增加，“样品至移液器”污染的风险更高。

“移液器至样品”污染

当受污染的移液器或移液器吸嘴携带污染物直接接触样品时，就会发生“移液器至样品”污染。

移液器与样品之间的污染有多种来源。一种是移液器的成分，其中抗氧化剂、杀菌剂、紫外线稳定剂、颜料和其他可能包含在移液器吸嘴塑料中的成分浸出到样品中。此外，移液器吸嘴制造过程中的残留物也会污染样品。其他污染来源则包括实验室内的环境或空气污染物等。

残留（样品间）污染

来自一个样品的气溶胶或液滴无意中被带到另一个样品中（图2），即可造成样品间污染。当移液多个样品或多个实验人员共用单个移液器时，这种类型的污染尤其常见。

图 2：样品液滴粘附在移液器吸嘴内壁上造成的残留污染。

残留污染最常见原因是移液器吸嘴的重复使用，其中样品中的液体残留物粘附在移液器吸嘴壁上，之后与下一个样品混合即可造成污染。此外，当样品中的气溶胶污染移液器主体，最终进入另一个样品时，也可能发生残留污染。

使用正确的移液工具和正确的移液操作，提高样品完整性

移液过程看似简单，但许多污染物和潜在污染来源可能会破坏实验结果。通过选择适当的移液工具和采取正确的移液操作，并及时适当地进行除污处理，可以最大限度地降低污染风险并实现最佳的样品完整性。

选择合适的移液工具

要想最大限度地减少样品污染，其重要考虑因素之一是选择使用哪些工具和耗材。

实验人员应确保选用的移液器适合所涉及的样品类型。对于大多数水性样品，可选择空气排代式移液器。而对于更具挑战性的样品，例如粘性、挥发性和腐蚀性样品，外置活塞式移液器是最佳选择。

空气置换式移液器存在一段气室，通过气体体积变化推动液体吸取排出；而外置活塞式移液器的工作方式类似于注射器：位于毛细管吸嘴尖端内的活塞与样品直接接触，从而消除了未受保护的气室的影响。这样可以防止气溶胶形成并避免样品与移液器的接触，从而减少样品与移液器、移液器与样品之间的污染。同时，外置活塞式移液器有助于在移取麻烦液体时确保实验人员的安全。

选择正确的移液器吸嘴同样重要。对此，需要考虑吸嘴的类型、无菌性、纯度等级和质量。

就移液器吸嘴类型而言，滤芯吸嘴是一种有效使污染最小化的选择，可以避免气溶胶从移液器吸嘴传递到移液器主体，反之亦然。因此，选用滤芯吸嘴可降低样品到移液器和移液器到样品污染的风险（进而降低样品残留污染的风险）。

选择高纯度和无菌等级的移液器吸嘴也是关键，特别是对于减少“移液器至样品”环节的污染。一般来说，实验室在处理生物或临床应用时应使用无菌滤芯吸嘴。

使用高质量的吸头是提高样品完整性的另一个关键因素。借助高质量的吸头，实验室可以降低或消除多种“移液器至样品”环节污染的风险。然而，移液器吸嘴的质量由多种因素决定，实验者需仔细筛选。

进行正确的移液操作

虽然合适的工具至关重要，但正确的移液操作对于样品完整性也至关重要：

• 取样时垂直握住移液器，可降低样品回流污染移液器的风险。

• 缓慢而有序地分配液体。有效避免样品飞溅和气溶胶的产生，这两者都可能导致“样品至移液器”环节的污染。

• 移取不同样品时更换移液器吸嘴。可降低样品残留造成的“样品之间"污染的风险。

• 将吸嘴弹射到指定的容器中。用过的移液器吸嘴应妥善处理在指定的容器中，可降低实验室环境被污染的风险。

•不使用时垂直存放移液器。使用移液器支架可防止样品回流至移液器主体，同时，移液器支架不仅是桌面整理的有效工具，还能避免移液器的意外损坏，以及移液器损坏导致的污染风险。

定期清洁移液器

即使严格遵守上述预防措施和正确操作，仍不可避免移液器被污染。因此，作为每个实验室标准操作程序（SOP）和实践指南的一部分，定期进行移液器清洁是非常必要的。

可每天使用无绒布浸润蒸馏水和消毒液（如70%乙醇溶液）擦拭移液器外表面。乙醇擦拭可有效减少微生物的污染，但它对消除其他污染物效果不理想。

高温高压灭菌也是一种非常常见且高效的灭菌方法。它优于其他除污方法如乙醇擦拭，因为通过高温高压，能有效地穿透移液器表面，消除更麻烦的污染物，如孢子。进行高温高压灭菌处理时，应确保根据标准参数，以免损坏移液器。此外需注意，并非所有移液器和吸嘴都能进行高温高压灭菌，且高压灭菌的作用范围有限（例如，高温高压并不能破坏RNase）。

表2总结了其他几种针对特定污染物的清洁方法：

污染类型	清洁试剂	操作指导
放射性化合物	洗涤剂	拆除下半部分，放入超声波清洗，加入实验设备洗涤剂；确保放射线降至可接受水平
病毒、细菌、支原体、真菌	UV照射	表面在300nm UV照射15分钟； *内部元件不可以暴露
DNA, RNA, 生物样本	10% 漂白剂或UV照射	移液器下半部分浸入3%次氯酸钠至少15分钟，蒸馏水漂洗，擦干；表面UV照射30-60分钟（可减少DNA污染，但不可完全消除）
水溶液和缓冲液酸/碱	水洗	下半部分使用蒸馏水清洗并擦干
有机溶剂蛋白质	洗涤剂	拆除下半部分，放入超声波清洗，加入实验设备洗涤剂；蒸馏水清洗数次并擦干