光谱探索者:解密紫外分光光度计的奇妙世界
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今下来我们进入今日份的主题
聊一聊我们的紫外可见分光光度计
基本原理
紫外分光光度法是根据物质的吸收光谱,来研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。
由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。
基本结构
紫外可见分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理及显示系统五部分组成。
光源
光源的作用就是提供激发能,使待测分子产生光吸收,可见光区:钨灯,碘钨灯(320~2500nm)紫外区:氢灯,氘灯(180~375nm);氙灯:紫外、可见光区均可用作光源。
单色器
将光源的复合光分解为单色光束的装置,它是分光光度计的核心部分,直接影响测定的灵敏度、选择性及准确性。
样品室
又称比色皿,用于盛放空白样品和待检测样品使用;
比色皿底部和两侧为毛玻璃,另两面为光学透光面,为减少光的反射损失,吸收池的光学面必须完全垂直于光束方向;
根据材质可分为玻璃池和石英池两种,玻璃池只能用于测量340 nm以上可见光区;石英池主要用于测量紫外区。
检测器
将光信号转变为电信号的装置。
显示器
将检测器输出的信号放大,并显示出来的装置。
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我们的优势
高稳定性
其稳定性应包括基线漂移和光度重复性两个方面。我们的基线漂移很小、重复性好,满足使用要求。
光谱带宽
光谱带宽对于分析测量误差具有重大影响,宽度越小,测量的分辨率越高,根据不同物质,选择不同带宽。
低杂散光
它是光谱测量中误差的主要来源。杂散光数值越小越好。
波长准确度高
波长准确度是指测的波长值与理论值(真实值)之间的差异。尤其在比较不同仪器的测试结果时,波长准确性更为关键。
应用
1. DNA和RNA分析
DNA和RNA在紫外可见光区域( 200-400纳米)具有特定的吸光特性,这使得紫外可见分光光度计成为测量核酸浓度和纯度的常用工具,并可揭示蛋白质或化学污染。
2.药物分析
在药学领域,可用于分析药物的含量和纯度。例如,苯佐卡因(一种局部麻醉剂)和金霉素(一种抗生素)可通过将第 一个数学导数应用于吸光度光谱, 同时在商业兽用粉末制剂中进行鉴定。通过为每种化合物构建校准函数,可以在微克/毫升的浓度范围内同时定量这两种物质。
3.食品分析
在食品行业中,可用于分析食品样品中的化学成分和营养成分。例如,可以使用该仪器来测量食品中的维生素含量、抗氧化剂含量或添加剂的浓度。这对于确保食品质量、验证产品标签中的声明以及监测食品安全非常重要。
4.环境监测
可用于监测和分析环境中的污染物。例如,在水质监测中,可以使用分光光度计来测量水样中污染物的浓度,以评估水体的质量和环境健康。
5.其他应用
在植物生化分析中可用于检测叶绿素、全氮和酶的活力等;在饲料分析中可用于检测烟酸、棉酚、磷化氢和甲酯等。
标签:紫外分光光度法
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