仪器网（yiqi.com）欢迎您！

GB/T 5750-2023《生活饮用水标准检验方法》于2023年3月17日由国家市场监督管理总局（国家标准化管理委员会）批准发布，以替代实施16年之久的GB/T 5750-2006《生活饮用水标准检验方法》，新标准将于2023年10月1日起正式实施。

本文针对GB/T 5750.12-2023 《生活饮用水标准检验方法 第12部分：微生物指标》中微生物检测指标和检测方法等内容的变化进行解读。

水质检测的重要性

水是生命之源，是生存之本。而在水体中，只要条件合适，极易引起微生物生长，进而污染水体本身，对生态环境及人们的健康造成威胁。尤其在生活饮用水中，滋生的病原微生物易引发人体肠道功能紊乱，发生呕吐、腹泻等病理性疾病，严重时可能危及生命，因此水质微生物检测至关重要。

水中微生物检测最 新法规变化

相较于GB/T 5750.12-2006，GB/T 5750.12-2023中增加了以下检测指标和检测方法，以提升对水质的监控。

1

新增两类微生物检测指标

肠球菌及产气荚膜梭状芽胞杆菌

两类微生物指标虽在GB/T 5749.12-2006版《生活饮用水卫生检测标准》中即规定了在饮用水中的参考限值，但并未规定检测方法。GB/T 5750.12-2023中增加了两类微生物的检测指标及检测方法，进一步加强了国家对生活饮用水水质微生物的控制要求（表1）。

◉肠球菌（新增）——增加了多管发酵法和滤膜法；◉产气荚膜梭状芽胞杆菌（新增）——增加了滤膜法。

2

新增了菌落总数和两虫相关检测方法

GB/T 5750.12-2023对部分微生物指标的检测方法进行了方法新增，新增方法在一定程度上简化了微生物检测步骤，提升检测效率（表1）。其中贾第鞭毛虫和隐孢子虫（两虫）在GB/T 5749-2006版中属于非常规性指标，而在新规GB/T 5749-2022中则延伸为扩展性指标，可见两虫检测的重要性。

◉ 菌落总数——增加了酶底物法；◉ 两虫检测——增加了滤膜浓缩/密度梯度分离荧光抗体法。

表1：GB检测方法调整对比

注：橙色字体为新增微生物指标及检测方法

3

微生物定义更明确

菌落总数的定义从原有的“水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养48h后，所得1ml水样所含菌落的总数”，变更为在“一定条件下、经一定时间培养后所得1mL水样中的微生物菌落个数”，定义更简略，适用范围更广；总大肠菌群的定义在新版国标中未写明结论，但需要进行证实实验及革兰氏染色结果判定，定义更简洁，但其中富含的信息更多样；对于耐热大肠菌群的定义直接明确培养温度，简单明了；而两虫在最新修订版中除了常规定义外，还细化了两虫外形特征的描述，以便更好地观察（表2）。

表2：GB部分微生物指标定义差异对比

注：橙色字体为定义差异变化

4

部分检测方法新增质量控制要求

GB/T 5750.12-2023对于部分检测方法或方法涉及的培养基要求等增加了质量控制内容。质量控制内容主要包括培养基检验及对照试验要求。

4.1

菌落总数

在新版GB/T 5750.12-2023中，对新增酶底物法主要规范了培养基验证质量控制环节，具体内容如下表3。

表3：菌落总数酶底物法培养基质量控制

4.2

两虫测试

两虫测试中的免疫磁分离荧光法质量控制要求在旧版和新版国标中类似，仅验证测试的周期及阴性对照使用的水质存在差异，而新增的滤膜浓缩/密度梯度分离荧光抗体法质量控制过程与免疫磁分离荧光法具有较大区别，具体差异如表4。

表4：两虫在新旧国标及方法上质量控制差异

4.3

肠球菌及产气荚膜梭状芽胞杆菌检测

在GB/T 5750.12-2023中，肠球菌属于新增检测指标，其包含多管发酵法和滤膜法两种检测方法；与肠球菌相同，产气荚膜梭状芽孢杆菌同为新增检测指标。两种新增指标所涉及质量控制环节内容均包括培养基检验及对照试验，具体内容见表5。

表5：肠球菌及产气荚膜梭状芽胞杆菌

 泰林水质检测相关解决方案 

泰林生物针对GB新法，推出了即时、简便的检测试剂及设备。

1

菌落总数检测—酶底物法

针对菌落总数，泰林推出了酶底物法菌落总数检测系统：包括酶底物法菌落总数检测组件ETCP-100和ETCP-25两种。其检测结果可配套酶底物法微生物自动计数仪或三用紫外观察箱进行计数。

图1：菌落总数检测组件

主要优势有：

◉ 操作简单快速；手工操作少于1分钟，无需准备琼脂平板，有效降低了操作过程中的污染风险；

◉ 检测范围大；可检测1-738MPN/mL，比平板计数法范围大；

◉ 复合酶底物覆盖广；所有可培养微生物均显荧光；

◉ 数据准确；与倾注平板法比较无差异，相关系数（r）达到0.97；同时克服平板计数时，由于部分菌落生长过快，计数不准确的缺点；

◉ 检测更高效；质控（QC）过程简单，有效提升生产效率，降低人力成本；同时48小时显示结果，72小时内观察结果仍然有效，减少人员加班。

2

总大肠菌群、大肠埃希氏菌检测—酶底物法

针对大肠菌群检测，泰林推出了酶底物法大肠菌群检测试剂CDR-100，其检测过程与结果可与程控定量封口机、定量盘、酶底物法微生物自动计数仪共同使用。

图2：酶底物法水中微生物检测系统

主要优势有：

◉ 操作简便快速；降低环境或人员操作要求，最快2min完成操作；

◉ 检测时间短；24小时即可完成定性定量分析，无需验证试验；

◉ 结果判读直观；通过黄色孔和荧光孔颜色变化判定结果；

◉ 封口机性能稳定；可调整封口温度，连续检测样品，不会出现漏孔、串孔、破孔、漏液情况；

◉ 结果计数方便快速；全程自动化操作，Al算法自动追踪阳性孔，10秒内出具结果。

3

质控菌株

泰林提供可定量的质控菌株，不同浓度规格可选，用于培养基质控验证，酶底物法检测试剂及检测方法的有效性、准确性验证。
-大肠菌群检测试剂质控菌株：大肠埃希菌、克雷伯氏菌、产气肠杆菌、铜绿假单胞菌、粪肠球菌、金 黄 色葡 萄 球 菌；
-肠球菌检测质控菌株：大肠埃希菌、粪肠球菌；
-产气荚膜梭状芽孢杆菌检测质控菌株：产气荚膜梭状芽孢杆菌、生孢梭菌。

图3：质控菌株系列

4

微生物检测系统—滤膜法

泰林推出微生物检验仪、微生物检验过滤支架、检测滤杯、微孔滤膜、自动菌落计数器等一系列设备耗材。该系统基于薄膜过滤法，供试品过滤后可能存在的微生物被滤膜截留，贴膜进行培养，以检验供试品含菌量。

图4：膜过滤法微生物检测系统

更简单、更高效、更便捷的

水质检测解决方法

水资源的卫生状况与人们的生活息息相关，即时、便捷、专业性要求弱的酶底物检测方法则在一定程度上，简化了操作步骤，进而实现水体卫生的快速评价。

表6：水中大肠菌群检测方法对比

此外，两虫也是水资源污染的重要病原微生物，近30年来，世界范围内发生了数百次以水为传播媒介由“两虫”引起的疾病爆发；在我国，也有多省区的畜牧业牲畜被“两虫”感染，接近一半的水源地存在“两虫”潜在威胁。

图5：微生物安全与健康网资讯

滤膜浓缩/密度梯度分离在操作上较免疫磁分离荧光抗体法收集更快捷，回收率更高，通过智能识别算法自动进行两虫识别计数，可大幅降低检测时间和检测成本，让两虫的检测更经济、便捷。

 图6：两虫检测操作流程

泰林始终紧跟国家发展战略，聚焦行业应用痛点，持续加强研发和技术创新，致力于为广大客户提供更简便、更高效的微生物全流程解决方案。

关于我们

浙江泰林生命科学有限公司，是泰林生物（股票代码:300813）旗下的全资子公司。公司系国家高新技术企业、国家专精特新小巨人企业，建有省级企业高新技术研发中心。

公司致力于为生物制药、食品、医疗、水务等领域提供微生物检测系列产品，包括无菌检查、微生物检测相关仪器和耗材，以及高性能分离膜、免疫层析（NC膜）等。产品服务全国食品、药品检测机构、制药企业、IVD生产企业、医疗机构等。

依托成熟的技术研发与市场营销体系和完善的服务体系，产品远销50多个国家和地区，不断向专业化、规模化、国际化方向迈进。