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近期，中国科学院上海药物研究所果德安/吴婉莹课题组在Acta Pharmacologica Sinica（APS）上发表了题为“Mass spectrometry imaging:new eyes on natural products for drug research and development”的综述文章，中国科学院上海药物研究所侯晋军高级工程师为该文章的第 一作者。文章从药物研发角度总结了质谱成像技术在天然产物体外和体内异质性分布研究中的应用，希望MSI技术能在天然药物新药开发方面提供突破，并对质谱成像技术在新药研发方面的未来发展进行了展望。

*本文内容摘录自知乎 — 岚翰生命科学。

天然产物（Natural products，NPs）及其结构类似物是创新药物开发的主要来源。然而，目前无论是在发现NPs方面，还是临床前对其进行药物评价方面，都存在异质性空间分析的盲区，这限制了天然药物来源的新药研发。

质谱成像（Mass spectrometry imaging，MSI），不仅可以同时检测数千种化合物，且无需标记，还能够提供研究样品中分子的空间分布信息。在过去的20年中，随着MSI方法逐渐改进和多样化，NPs在植物、微生物以及体内研究中的各种应用得到了迅速的发展。

因此，作为一种强大的可视化分析技术，MSI可以原位发现独特空间分布的微量NPs，原位探索候选药物新的靶向器官，在空间异质性的器官/组织内部指导药物的制剂设计；并通过在无标记的基础上提供数千个分子的高空间分辨率原位信息来揭示药物的新机制，有利于从NPs进行更好的新药研发(图1)。

图1. 质谱成像通过可视化药 用植物和体内的分子空间异质空间分布促进NPs的发现及其临床前研究。（图源：Hou JJ,et al., Acta Pharmacol Sin,2022）

1MSI可以通过可视化NPs在药 用植物中的异质性分布来促进NPs的发现

NPs主要来自于药 用植物/微生物的次级代谢物和一些初级代谢物，NPs在药 用植物中的分布通常是异质性的。通过MSI技术，可以直观地看到初级和次级代谢物，研究其在药 用植物中的空间分布异质性，有利于更好地发现新型NPs用于新药开发。

首先，MSI有助于更好地了解NPs的富集部位，利于优化其提取方法。质谱成像技术具有无标记、高空间分辨率的优势，使得可以对药 用植物中的天然成分的空间分布进行分析，获得其在微观组织的分布特点，从而为天然成分的提取提供依据。近五年来采用质谱成像技术已经对多种药 用植物进行了研究，包括穗花牡荆、银杏、贯叶金丝桃、沉香、姜黄、长春花、丹参、北美檫树、牡丹、芍药、三七、黄皮、人参、枸杞子、何首乌、桃仁、苦杏仁和郁李仁等。

第二，MSI有助于更好地了解NPs生物转化过程，利于提高NPs含量。天然成分的产生一方面来自其生物合成过程，一方面来自于周围环境与药 用植物的相互作用，对此两个环节的认知，有助于找到提高天然成分含量的方法。质谱成像在探索上述两个方面均能发挥较好的作用。

第三，MSI有助于直接发现新的天然成分。有些天然成分有可能通过质谱成像技术发现，却有可能被传统LC-MS技术忽略。这主要是由于在粉碎提取后，这些成分会被大量高丰度成分淹没或发生变化；而通过直接原位分析组织切片样本，则有可能由于其在组织局部的聚集，从而导致新的成分被检测和发现。

MSI在上述三方面的研究，为更好理解药 用植物中NPs的生成过程、发现新的NPs并最 终获得NPs提供了直观的分析手段(图2)。

图2. 质谱成像在药 用植物/微生物天然产物发现中的应用。（图源：Hou JJ,et al., APS,2022）

2MSI可以通过可视化体内异质性NPs的空间分布来促进药物研发

从药 用植物/微生物中获得具有生物活性的NPs后，基于以下三个方面，可以应用MSI技术来促进临床前研究：

第 一，在吸收、分布、代谢和排泄（Absorption, distribution, metabolism and excretion, ADME）和药代动力 — 药效学（Pharmacokinetic-pharmacodynamic, PK-PD）研究中，MSI可以提供化合物的直接空间分布，便于对NPs及其ADME特性进行更直观的空间异质性分析。同时，可以建立NPs与原位内源性药效生物标志物之间的空间关联性(图3)。在药物开发中，MSI技术在空间分辨率，化学信息提供及非标记方面具有独特优势。首先，质谱成像技术能非标记地直观提供药物体内的空间异质性信息。MSI还能够直观提供药物吸收的空间过程，解决传统分析方法难以观察的过程。药物的皮肤吸收和肠道吸收是研究药物体内吸收的主要环节，采用质谱成像技术可以直观提供药物皮肤和肠道吸收的深度和程度。此外MSI可以直观同时提供多个代谢物的空间分布信息并同时提供药物的相关药效标志物的空间关联性。MSI的无标记的优势使得该技术不仅能高空间分辨率的可视化NPs及其代谢物的空间分布特点，而且可以同时观测药物干预后的体内内源性药效标志物的时空变化。

第二，“治 疗异质性”是药物作用的特点，在药效和安全性评价和预测研究中，MSI技术能够促进NPs药效和毒性分析的精 准性和预测性(图4)。首先，对药物在靶器官分布的空间异质性分析，可以更好地理解药物的药效异质性。其次，当药物不能良好的在靶标处分布，则会降低药物的疗 效，而这在传统组织分布中很难观察到。而药物在体内富集分布的器官，必然与其药效或毒性有必然联系。随着MSI的广泛应用及其空间分辨率和灵敏度的提高，根据质谱成像分析的结果预测天然药物潜在的药效或毒性靶器官成为可能。

第三， MSI能够提供NPs修饰、制剂优化和纳米材料选择的合理性。NPs通过化学修饰、制剂优化或选择合适的纳米材料，可以有效的提高药物的靶向性。MSI能够利用其直观分析的特点，直观展示优化后药物的靶向分布，为优化提供直观证据。此外，随着金属纳米材料在药物制剂开发中的扮演者越来越重要的作用，对其在体内分布的关注也更加重视。由于金属纳米材料自身的特性，在基于激光的质谱成像平台下，金属纳米材料有特征的质谱信号，可以用于对其监测，并进行空间分布的分析。

图3. 质谱成像在药物开发ADME和PK-PD研究中的应用。（图源：Hou JJ,et al., APS,2022）

图4. 质谱成像在药物疗 效和毒性分析的准确性、可预测性以及化学修饰和剂型设计中的应用。（图源：Hou JJ,et al., APS,2022）

总结与展望
MSI作为一种强大的可视化分析技术，因其能够无标记地展示上千分子在组织空间的分布，对NPs的研究及其对疾病干预的认知起到独特的作用。随着MSI的发展，其在以下四个方面将有更令人期待的创新应用：

第 一，随着质谱成像仪器平台的发展，采集像素分辨率和采集速度的提高，将使单细胞和亚细胞级的质谱成像分析更加易于实现，将能更好的与现有生物领域的研究结果相结合；

第二，随着其它空间组学技术的发展，尤其空间转录组学向单细胞分辨率的提高，二者的结合将为时空分辨的研究提供更强大的分析手段；

第三，随着超高分辨质谱成像与代谢流技术的深度结合，将更好的研究体内代谢在空间维度的动态变化；

第四，质谱成像分析公共数据库建立和数据挖掘的应用，将促进质谱成像技术的广泛应用。MSI在上述四方面的发展，将为深入开发和研究NPs提供强大的时空分析手段。

但MSI必须在组织切片上进行分析，故难以实时分析在活体组织中分子的动态分布。而实现对植物和动物内部所有分子的实时可视化分析是人类的梦想之一 — 这正是引领技术前进的第 一推动力。