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新色谱柱总是很昂贵，而且研究机构和小公司很少有雄厚的财力，因此每种方法都需要一个新色谱柱只是一个一厢情愿的想法。 相信大多数学生或者同事的实验室里总会有一批用过的色谱柱。 当我们需要开发新方法的时候，老板总会从抽屉里或者其他角落里拿出一根旧柱子，神秘地告诉你这个柱子的悠久历史。 希望您能利用本专栏再创辉煌。 。 这个时候，相信很多同学已经心跳加速了。

不过说实话，色谱柱是否值得再生以及如何再生一直是一个传说。 笔者今天也遇到了这个问题，并做了一些深入的调查。 发现事情没那么简单。 一般来说，我们首先要考虑的是是否值得在旧柱子上浪费时间。 当然，这不适用于那些老板有死马当活马医心态的同学。 不管怎样，作为一个行业新手，我们的时间在老板眼里都是浪费的。

一般来说，C18色谱柱的寿命约为2000次，但根据实际情况可能会有很大波动。 如果旧柱的使用次数与预期寿命相差不大，则无需在其上浪费时间。 一方面是投入产出比太低，另一方面，对于开发一种全新的方法，旧的色谱柱会出现各种问题，比如基线不稳定、各种鬼峰、分辨率低、等等。不妨说服老板买一根新的柱子。

对于科学研究人员来说，有时我们可以通过插入数百个样本来完成一个项目。 如果这座柱子被废弃了，那就太可惜了。 大多数老板都会暂时将其放入冷宫，等待在对的时间遇见对的你。 对于这种支柱，值得花一些时间在上面。 也有一些支柱由于使用不当而导致性能下降。 我也会考虑使用一些方法来重新生成它们。

如果色谱柱长期不使用或操作不当，会引起一些问题，如固定相完全干燥、色谱柱入口筛板被颗粒物堵塞、表面键合官能团损失等。固定相的问题、柱内不溶物的积累等，针对不同的问题我们有不同的解决方案。 例如，如果保护液蒸发并且固定相完全干燥，这并不是什么可怕的事情。 用有机相缓慢冲洗即可恢复。

柱入口筛网堵塞的问题可以通过反冲洗来解决。 在日常使用中要注意预防这个问题。 大多数颗粒物可以通过保护柱和样品过滤去除。

固定相表面键合的官能团会随着使用时间的增加而慢慢消失，这就是为什么使用一段时间后柱效会下降。 这是正常现象，无需担心。 需要注意的是，一些极端条件会加速这个过程，例如流动相的pH超过色谱柱的耐受范围。 如果发生异常丢失，该柱基本上是无法修复的。

沉积在柱中的不溶性物质仍可通过一定的程序被洗脱。 柱子的再生往往就是指这个过程。 对于大多数问题，可以依次用乙腈或甲醇、二氯甲烷冲洗色谱柱，然后再用乙腈或甲醇冲洗，最后按相反顺序用流动相冲洗。 冲洗的溶剂种类、时间长短和顺序可根据实际情况进行调整。 下面是一个实际的例子：

100%甲醇

100%乙腈

75%乙腈+25%异丙醇

100%异丙醇

100%二氯甲烷

100% 正己烷

100%异丙醇