徕卡课堂 | 药学研究哪家强,徕卡切割帮您忙
在癌中,85%的病人诊断后处在恶性程度很高的阶段,主要的特征是浸润近端的淋巴结和血管结构,也伴随转移到肝和腹膜。吉西他滨作为药能够产生一些临床效果,但是也仅能起到有限的控制病情,只有小于15%的病人在诊断后6个月中病情不在进一步恶化。尽管与其他辅助化学药如卡培他滨、厄洛替尼等四药联合ZL,也收效甚微。根据CONKO-001和ESPAC-3的试验,吉西他滨在佐剂的辅助下也能增加病人的存活率。但是,Z有效佐剂的化学疗法尚不清楚。肿瘤切除病人的5年存活率依然徘徊在10%和20%之间。
因此,鉴定在癌中影响吉西他滨药效的因子就变得非常重要,这不仅可以Zda化治LX果,还可以避免无用的ZL手段。在吉西他滨ZL的病人当中,药理学研究表明表达DNA修复酶或多肽与核苷酸转运蛋白之间存在相关性。然而,在预后的病人当中潜伏的生物标志的基因型或表达水平非常少。
全基因组分析表明,PDAC是由于一些基因突变引起,这些基因通过核心信号通路中的一些小的序列发挥功能。这不仅可以帮助我们探索发病机制,而且提示我们药物靶向ZL的结点就在基因的表达调控之中。
Z近,MicroRNA(miRNA)作为一种对基因有负面调节作用的因子对基因调控有重要作用,它主要是通过压制或直接裂解mRNA发挥功能。MicroRNA可以控制增殖、分化和凋亡,一些microRNA基因位点的易位或缺失以及异常的表达常见于很多肿瘤中,它们可以作为肿瘤压制基因和癌基因。此外,一些特定的microRNA可能会影响化学疗法的ZL。
表达谱鉴定了4种microRNA在PDAC中有异常,它们是miR-155、miR-21、miR-221、和miR-222。其中miR-21在PDAC中表达增加。miR-21与卵巢癌的发生具有相关性,它还被认为在很多实体瘤中起到的作用,比如胶质瘤、胆管上皮癌、乳腺癌等。miR-21这种致癌的特性进一步的被功能性研究所支持,如果YZmiR-21的表达,可以减少很多癌细胞的增殖,如乳腺癌、肝癌和PDAC。相反,如果转染miR-21的前体,就会刺激侵入、渗出和转移,如神经胶质瘤、结肠癌、乳腺癌以及PDAC。
这些数据都提示miR-21可能与癌症的进展有关,因为它是Z容易检测出的而且也是数量Z多的MicroRNA之一。一些研究把它当做预后的生物标志。原位杂交的结果表明,miR-21的过表达定位于PDAC细胞中,预示着更短的存活率。但是,25位病人的大块肿瘤组织的PCR结果显示,miR-21与临床病理结果并无相关性,与化学ZL也无相关性。因此,我们进一步需要做的是使用激光显微切割技术(LMD)排除间质的影响,避免样品的污染。
Z近,也有研究报道miR-21与抵抗药物存在相关性。尤其是在胆管上皮癌和PDAC中YZmiR-21可以增加癌细胞对吉西他滨的敏感性。这篇文章主要的目的就是miR-21在PDAC各种类型组织细胞中的表达,以及与临床结果和吉西他滨药效之间的关系。
材料方法
选取了81位PDAC病人,制备冰冻切片,使用LMD获取组织,极ng确提取5000个细胞用于提取RNA,用于后期的qPCR分析,鉴定miR-21的拷贝数。LMD还提取了5个健康人的导管。
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