注意操作大鼠Elisa试剂盒事项与步骤
注意操作大鼠Elisa试剂盒事项与步骤
大鼠Elisa试剂盒注意事项:
1. 大鼠Elisa试剂盒冻结与寄存:-20℃取出后主张放入2~8℃冰箱中冻结约,每隔一段时间悄悄摇晃均匀,不可直接放入温度较高处冻结,防止因温度改变太大,形成蛋白质凝聚而出现沉积,血清的质量下降。若短期无法用完一瓶,主张无菌分装,再放回冷冻,防止反复冻融。4℃长时间保存后血清中的变性脂蛋白及纤维蛋白,形成絮状物质变差。
2. 大鼠Elisa试剂盒是否灭活:加热可灭HX清中补体系统,在极少数情况下(培育ES细胞,滑润肌细胞时)主张灭活,在培育其余细胞时不主张灭HX清。血清灭活十分简单产生沉积,如必须灭活请按56℃,30 min,轻微摇晃准则操作,灭活温度高、时间长、摇晃不均都简单产生沉积。
3. 大鼠Elisa试剂盒培育基:无血清培育基在结果重复性、细胞体外分化方面有优势,可是,血清仍然是培育液中Z根本的添加物,尤其是在原代培育或细胞成长状况不良时,常常会先使用有血清的培育液进行培育,待细胞成长旺盛后再换成无血清培育液。
大鼠Elisa试剂盒操作过程 :
1.用盖片镊人Elisa试剂盒将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭洁净,不要用纱布;
2.将盖玻片悄悄放入6孔培育板(每孔一片)或培育皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在间隔紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将通过计数的细胞悬浮液移入培育板中,使盖玻片彻底浸在培育液中;
5.将人Elisa试剂盒培育板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞成长至覆盖培育板底部2/3面积时,将培育板取出,用盖片镊悄悄取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
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