送福利了 | 凝胶渗透色谱分析方法开发tips
凝胶渗透色谱法是体积排阻色谱法的一种,以水或者缓冲液为流动相;以有机溶剂为流动相的一般叫凝胶过滤色谱法。
两者都属于体积排阻色谱法(Size exclusion chromatography,SEC)。SEC是20世纪60年代发展的一种分离模式。它是根据空间结构不同的分子在多孔颗粒中的路径不同而进行分离。原理如下
原理
看完原理给我们就有了一个小的tips啦:
tips 1
分子直径比Z 大孔隙直径大的分子全部被排阻在凝胶颗粒以外,两种或两种以上的这样的分子不能达到分离效果。
tips 2
分子直径比Z小孔隙直径小的分子能全部进入凝胶颗粒内部,这样的两种或两种以上的分子也不能达到分离效果。
应用领域
生物药质控
•单抗
•双抗
•ADC
•融合蛋白
•血液制品
•重组白蛋白
•糖蛋白
•PEG蛋白
•多肽
•多糖
•纤维素
生物药工艺监控
•单抗
•双抗
•ADC
•融合蛋白
•血液制品
•重组白蛋白
•PEG蛋白
•多肽
辅料和残留分析
•吐温80/20
•聚乙二醇
•泊洛沙姆
•聚乙烯吡咯烷酮
食品化药领域
•水溶性抗生素聚体分析
•乳品中乳白蛋白和乳球蛋白分离
•中药中吐温20/80
不同的样品由于空间结构不同,在同一根柱子上的排阻范围不同。参考选用跟标准品结构Z相近的排阻范围内的柱子。如下BIOBASIC系列SEC色谱柱的不同标准品的校准曲线如下:
方法开发考虑因素
1、孔径分布
相近孔径分布的柱子,在检测同一个样品时,聚体与主峰或者主峰与片段的分离可能会存在比较大的差异。
2、粒径
不同的粒径的相近孔径分布的柱子,分析需要的柱长和分析时间会有差异。
3、缓冲体系
缓冲体系中流动相的组成,pH值可能会改变蛋白的三维结构和折叠状态,进而影响单体,片段与聚体的分离。
4、盐浓度
由于包裹技术的差异,样品可能会跟色谱柱之间存在一些离子性吸附,这个时候,需要提高流动相中盐的浓度来屏蔽这种作用。Mabpac SEC 系列优异的包裹技术,可以在比较低的盐浓度下分析蛋白样品,进而用于Native 质谱方法开发。
仅仅给出方法开发tips怎么能表达我们的诚意呢,我们更推出了免费SEC做样的服务,快快扫描以下二维码报名参加吧:
全部评论(0条)
推荐阅读
-
- 新年好开头,拍照送福利!
- ?即日起,拍摄 LAUDA 温控和其配套使用的设备照片,发送至我们的邮箱,并留下您的联系方式,即可获赠 LAUDA 便携式运动袋!
-
- 凝胶渗透色谱仪的行业动态
- 凝胶渗透色谱仪(Gel Permeation Chromatography,简称GPC)是一种常用的分离和测定高分子聚合物分子量分布的技术。它利用高分子聚合物在溶剂中的渗透行为,通过样品溶液通过固定相
-
- BUNSEN本生给您送福利啦
- BUNSEN本生给您送福利啦
-
- 双十一不套路!福利送不停
- 观看以下视频参与答题,即有机会获得精美好礼一份。答题正确率越高,获奖概率越高哦~礼品数量有限,先到先得,送完为止。
-
- 仪器生产齐唤醒,直播福利送不停
- 2022年6月16日 指定耗材满额赠送黄金优享维保服务
-
- 辽宁省发布畜产品质量安全检测色谱分析方法 色谱分析仪市场前景广阔
- 辽宁省发布了畜产品质量安全检测色谱分析方法。 此消息引起广泛关注。 色谱分析作为重要的检测技术,在保证食品安全和质量方面发挥着重要作用。
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布,观点仅代表作者本人,不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们立即通知作者,并马上删除。
②凡本网注明"来源:仪器网"的所有作品,版权均属于仪器网,转载时须经本网同意,并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱:hezou_yiqi
参与评论
登录后参与评论