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1.使用手性柱时柱压过高是什么原因造成的呢？

长期超压会引起柱头塌陷，反压上升，柱效下降。

原因：

•流动相或样品溶液过滤不彻底，固体颗粒堵塞管路或柱头，会引起柱压过高。

•样品中成分在柱头析出或强烈吸附，会引起柱压升高。

•流速过快，会引起柱压过高，特别是当使用粘度高的溶剂，如IPA, EtOH，流速应控制在0.1-0.3 ml/min

解决办法：

•遵循每种柱子的特定的承压范围

•彻底过滤流动相及样品溶液

•样品预处理

•更换流动相时，或者刚把柱子刚接上仪器的时候，逐步增加流速

•仪器设定保护柱压

2.化合物在手性柱中的“残留效应”经常会对影响手性柱的分离度和出峰时间等，该如何处理？ 如何冲洗？

残留物在普通流动相中可长时间地稳定保留

•用醇洗涤可除去大部分的碱性残留物

•用酸洗涤也可除去碱性残留物

•用碱洗涤可除去酸性残留物

•推荐分开使用酸性条件手性柱和碱性条件手性柱

3.手性柱谱图中异构体的分离度下降了，可能是什么原因，该怎么办？

分离度下降的原因有可能是色谱柱以外的色谱条件发生了变化，或者色谱柱受损柱效发生了变化。

首先查看是否是因为温度、流动相成分等外在因素发生了变化导致分离度下降，如果排除了各种外在因素就有可能是分析柱本身的柱效下降导致的。

如果分离度在短时间内急剧下降伴随柱压上升， 可能是有强极性溶剂损害了柱子；如果分离度在长时间内慢慢下降，可能是柱头受污染或柱头塌陷，需要更换保护柱或者更换分析柱。

4.手性柱谱图中的峰出现裂分，可能是什么原因， 该怎么办？

峰裂分的原因有可能是色谱柱以外的色谱条件发生了变化，或者色谱柱受损柱效发生了变化。 有时样品溶液浓度太高，进样量太大也会裂缝， 这种情况只需减少浓度进样量即可。

如果排除了各种外在因素，那么色谱柱本身的原因可能是柱头被污染，或者柱压太高导致柱头塌陷。

柱头污染的话，可以按照说明书采用不同的溶剂溶剂冲洗色谱柱，zui好是反方向冲洗；或者更换保护柱。

如果是压力太高导致柱头塌陷，那么除了增补填料，基本没有其他方法补救了，只能更换色谱柱。

5.基线不稳定可能是哪些原因，如何解决？

•仪器刚从反相置换到正相系统时，基线会不稳定， 只需要多平衡一会儿即可。

•检测器污染。卸下检测器，更换透镜；或者取出透镜，用甲醇、异丙醇、水或其他溶剂（根据该仪器平时的使用情况而定）超声清洗。

安装时注意透镜的方向，一面是平面，一面凸透。

•确认使用的两元（或三元四元）流动相彼此互溶性良好。

•确认正使用的流动相和仪器之前刚用过的流动相彼此互融；若不互融，需要选择合适的溶剂过渡。

•若噪音很大，有可能是需要更换氘灯。

•柱压不稳定导致的基线不稳。

6.柱压不稳定的原因可能有哪些，如何解决？

•泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，可用注射器抽出空气。

•比例阀失效，更换比例阀即可。

•泵密封垫损坏，更换密封垫即可。

•溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，通常是超声法脱气。

•系统检漏，找出漏点，密封即可。

•梯度洗脱，这时压力波动是正常的。