山东市监局发布《伪狂犬病净化技术规范 荧光RT-PCR检测法》
伪狂犬病净化
伪狂犬病是由疱疹病毒科疱疹病毒Ⅰ型伪狂犬病毒引起多种家畜和野生动物的传染病。采取一系列措施,达到消灭和清除猪伪狂犬病的过程。根据猪伪狂犬病的监测结果,淘汰感家畜,使种家畜中伪狂犬病逐渐被清除的疫病控制方法。
规范性引用文件
《GB/T 35911 伪狂犬病病毒荧光PCR检测方法》等
检测耗材:
1、mL离心管; 2、0.2 mLPCR薄壁管; 3、酶标板,移液器吸头。
检测仪器:
1、荧光PCR检测仪; 2、PCR仪和凝胶成像系统;
3、高速台式冷冻离心机; 4、组织研磨器或者研钵;
5、微量移液器; 6、酶标仪; 7、恒温箱; 8、高压灭菌锅。
检测试剂:
1、无水乙醇,-20 ℃预冷。
2、75 %乙醇,无水乙醇和双蒸水配制,-20 ℃预冷。
3、含dATP、dGTP、dCTP、dTTP各10 mmol/L,-20 ℃保存,避免反复冻融。
4、普通PCR引物参照GB/T 18641。
5、荧光PCR引物和探针参照GB/T 35911。
6、酶标检测试剂 等效采用PRV-gE基因缺失疫苗配套的商品化鉴别检测试剂。
采样技术:
前腔静脉或扁桃体采样,并及时对血样或组织样品规范保存、送检。采血过程及制样过程要防止污染并规范标记。
检测评估:
免疫后3W检测gB抗体和gE抗体。当gE抗体阴性时,如果90 %的样品gB抗体阳性,即可认为群体免疫合格。
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