免疫学抗体实验室方法

抗体作为实验试剂已有很多年了。可以发展专门针对想要抗原的特殊抗体。另外，抗体试剂与抗原相互作用的结合通常具高亲和力，这就使得检测很少量靶抗原成为可能。典型的靶蛋白是：高度纯化的蛋白质、糖蛋白、或这些分子复杂异质的混合物（如豚草属花粉）。

由于抗原结合区与效应分子的功能决定区在不同的区域，所以，免疫球蛋白（Igs）在基因和分子水平实际上是组合结构。例如，把编码某一特定恒定区的基因和许多编码可变区的基因中的任何一个相连，这一特定恒定区介导补体结合的能力能够得以维持同时仍能被精确地定为靶目标。因此，无论是由恒定区基因决定的防御机制，还是由许多可变区基因决定的结合抗原的特异性，Ig的基因家族都成功地保持了恒定。其中，可变区基因在进化期间已增加了很多，同时通过基因复制和体细胞突变，也扩充了许多。

同类抗体（异构型），Ig分子的恒定区中含有共同的肽结构。虽然这些抗体可以与不同的抗原起反应，但在免疫测定中，可以用同一抗体试剂检测他们。例如，与两种不同变应原（如豚草属花粉和猫的毛皮垢屑）起反应的IgE抗体，它们两者都可以用抗-IgE抗体来检测。其中，该抗-IgE抗体能与所有IgE分恒定区的某一肽段特异性地结合（见后）。在这个例子中，虽然每种抗体都有不同的抗原结合位点，但它们的ε重链恒定区的某一肽段都能与抗-IgE抗体反应。

当设计一个用抗原或抗体作试剂的免疫测定方法时，在选择合适的分析方法方面，Z重要的因素是待测物（抗原或抗体）的浓度。临床免疫实验室Z常用的免疫化学方法有：（1）凝胶沉淀法和比浊法，用于浓度相对比较高的分析物（毫克到微克每毫升）（2）竞争性替代或免疫测定技术，如放射性免疫测定（RIA）和酶免疫测定（EIA），用于较低浓度的分析物（微克到纳克每毫升）。免疫荧光显微技术，包括流式细胞仪，对检测细胞表面抗原或完整细胞内某些细胞浆或细胞核抗原很有用。各种方法大致的灵敏度限度列在表31-1。如接下来这部分所描述的那样，各种方法Z终都是以检测抗原抗体之间的反应为根据。

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