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- 【导读】细胞的复苏复苏细胞与冻存的要求相反,应采用快速融化的手段。这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损害。用品:培养液,吸...
细胞的复苏
复苏细胞与冻存的要求相反,应采用快速融化的手段。这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损害。
用品:
培养液,吸管,离心管,培养瓶,带盖搪瓷罐。
步骤:
(1)从保存安瓿的小袋内或支架上取出的安瓿应直接投入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化。如果安瓿熔封不严,在保存过程中液氮进入安瓿中,从液氮罐中取出时由于温度升高导致液氮急速气化而爆炸,使安瓿变得粉碎,飞溅的玻璃碎片可伤害面部等。因此,存取安瓿时都要佩戴眼镜和手套,安瓿投入存放温水的器皿中后应立即把盖子扣上,以防发生意外。
(2)从37℃水浴中取出安瓿,用酒精消毒后折断颈部,用吸管吸出细胞悬液,注入离心管并滴加10倍以上培养液,混合后低速离心,除去上清液,再重复用培养液洗一次。
(3)用培养液适当稀释后,接种培养瓶,放在37℃温箱静置培养,次日更换一次培养液,继续培养。如果复苏时细胞密度较高要及时传代。
细胞复苏时细胞数可以做10~20倍稀释,接种密度以5x105/ml为宜。仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
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- 2004-09-18 09:23:03
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