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- 【导读】TSZelisa试剂盒检测聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质注意事项1.最好多配制一份显色液,第一次显色到溶液变混浊时换一份显色液,显色到点清晰。2.显色过程很快,要注意把握时间,避免染色过...
TSZelisa试剂盒检测聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质注意事项
1.Z好多配制一份显色液,diyi次显色到溶液变混浊时换一份显色液,显色到点清晰。
2.显色过程很快,要注意把握时间,避免染色过度。
3.银染液和显色液需要预冷。
4.所用器皿要很洁净,不用手直接接触,以免杂蛋白污染!
5.清洗用水尽量用高纯度去离子水,蒸馏水更佳,可以减少背景着色。
6.固定时间较长,则加一步水洗30min,以免胶太脆而破碎。
7.甲醛在使用前加入。
实验原理:在碱性条件下,用甲醛将蛋白带上的硝酸银(银离子)还原成金属银,以使银颗粒沉积在蛋白带上。染色的程度与蛋白中的一些特殊的基团有关,不含或者很少含半胱氨酸残基的蛋白质有时候呈负染。银染的详细机制还不是非常清楚。
TSZelisa试剂盒试剂:乙醇、冰醋酸、乙酸钠、硫代硫酸钠、硝酸银、碳酸钠、甘氨酸或EDTA.Na2.2H2O、甲醛
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