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- 【导读】大鼠原代细胞在目前的细胞培养收获中,常用的方法是通过胰蛋白酶降解细胞间基质从而使得细胞与培养载体脱离,收获单细胞悬液。但是,胰蛋白酶在降解细胞外基质时,会分解细胞外膜蛋白,导致细胞...
大鼠原代细胞在目前的细胞培养收获中,常用的方法是通过胰蛋白酶降解细胞间基质从而使得细胞与培养载体脱离,收获单细胞悬液。但是,胰蛋白酶在降解细胞外基质时,会分解细胞外膜蛋白,导致细胞活力的降低。细胞通过温敏方式收获时,通过改变细胞生长表面的亲/疏水性,使得细胞能无损地从生长表面脱落。这种方法不仅提高了收获细胞的质量,同时在实际应用中有效地降低了人力和物力成本。
但是,按照ATRP法制备的温敏微载体CMPS-NIPAAm在细胞贴附能力上有一定的欠缺,尤其在搅拌悬浮培养细胞中,细胞贴附比较困难,导致大量的细胞漂浮。本实验中,利用表面起始的原子转移自由基聚合作用,在CMPS表面接枝上PNIPAAm。通过选择不同的PNIPAAm合成浓度,摸索出了Zyou的PNIPAAm浓度,使得细胞在温敏微载体表面具有很好的温敏脱附能力,还具有良好的贴附和增殖能力。另外,大鼠原代细胞使用多聚赖氨酸处理微载体,增加微载体表面细胞的贴附能力。
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