正在开发研究的疯牛病检测方法

当前，有很多公司正在开发BSE活体检测技术，也即宰前检测技术，有的技术也取得些取得良好进展了一些可喜的进展，此外，人们也正在致力研究高敏感检测技术。下面将的技术方法略作介绍。

（1）毛细管电泳免疫测定法（CIE）Schmerr早在1999年就提出了一种非常有前景的荧光标记肽连的毛细管电泳免疫测定方法，可以用于死后诊断。该方法灵敏度很高，能检测到pg级病原，因而可用于检测病原水平很低的血液、尿液等。该方法能从非肠道接种的仓鼠血液中检出BSE病原，目前这种方法已经用于临床前羊痒病的诊断，但这种方法还需要进一步验证。

（2）尿液检测法用电化学方法检测尿中的代谢产物有诊断价值，其特异性和敏感性即使低于要求，也有可能作为BSE诊断的独立方法。初步的数据表明PrP分子可以在感染牛的尿中检出，这就为诊断试剂盒市场化的进一步研究指引了方向，但是也需要有更进一步的评估和比对实验的数据来支撑。

（3）蛋白质错误折叠循环扩增技术（PMCF）这是一种体外扩增PrPSc的方法，在微量PrPSc模板存在的情况下，将正常PrPSc陕速转变为具有蛋白酶抗性的PrPSc。经过这种体外扩增技术，可以使Z初样品中PrPSc的量增加10～100倍。将阳性或可疑脑组织匀浆液与正常脑组织匀浆液混匀，37~C超声、孵育，受已有PrPc的影响，正常PrPc聚集并发生构象改变，再用不同德屎颓慷鹊某魃⒗┰霾木酆咸rPSc，并作为下一步扩增的模板，如此反复，从而产生更多的PrPSc。试验表明，痒病羊脑组织匀浆悬液被稀释到用Westernblot检测不到的水平，经过10次扩增后，能很容易地检测到PrPSc，从而有利于建立非常敏感的诊断方法，为早期诊断以及活体检测奠定基础。

（4）共聚焦双色荧光相关光谱法Bieschke等正在研究用免疫试验结合共聚焦双色荧光相关光谱法（confocaldual-colorfluorescencecorrelationspectroscopy，FCS）检测脑脊髓液中PrPSc的方法，该方法可检测约2pmol／L的PrPSc，比免疫印迹法还要敏感20倍。

（5）多光谱紫外荧光光谱法Rubenstein等正在建立多光谱紫外荧光光谱法（multispectralultravioletfluorescencespectroscopy，MUFS）检测PrPSc。MUFS产生的独特的光谱信号可以对prpsC进行定量分析。构象不同的蛋白质会产生不同的光谱信号，所以MUFS能鉴别不同种属的PrP。

（6）血纤维蛋白溶酶原磁珠法瑞士科学家发现一种普通的血液成分，即血纤维蛋白溶酶原，可以黏附到PrPSc上，但不会黏附到PrPc上。研究人员还发现用6mol／L的尿素或破坏PrPSc的构型时，这种结合性便会消失。这个发现为研究朊毒体疾病如何进展以及如何清除已受到污染的血液制品提供了新的线索。研究人员将血纤维蛋白溶酶原包被一些磁性珠子，然后磁性珠子与含有PrPSc的样品混合，提取出磁珠，发现磁珠表面黏满了PrPSc，因而此方法将来有望用于疯牛病早期检测或活体检测。

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