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- 【导读】葡聚糖凝胶LH-20的使用方法将干粉浸泡于60-70%乙醇中(充分搅拌),洗去可能存在的残留物,抽干然后湿态不间隙装柱,绝对不能出现凝胶断层(否则要重新装柱),动态用一倍柱体积的6...
葡聚糖凝胶LH-20的使用方法
将干粉浸泡于60-70%乙醇中(充分搅拌),洗去可能存在的残留物,抽干然后湿态不间隙装柱,不能出现凝胶断层(否则要重新装柱),动态用一倍柱体积的60-70%乙醇淋洗,再用水洗净乙醇即根据自己选用洗脱液平衡层析柱至少两个柱体积直到基线变得平稳为止,如改变溶剂应该注意凝胶在新溶剂中的溶胀性质,并根据性质确定柱高。如使用相同的溶剂,在以后的层析中柱平衡可以省略。
(1)选择条件:
梯度洗脱在葡聚糖凝胶LH-20使用中并不象在正相柱层析中那么重要。首先你的样品须要能溶解在尽量少量的洗脱剂中。极性在的用甲醇水系统;极性小者一般用不含水的系统,常用正己烷二-氯-甲烷甲醇系统。
(2)饱和层析柱:
用洗脱剂将凝胶摇匀,直立柱身,让其自然沉降,此时要防止气泡留在其中。至少半小时打开开关,流出几个柱体种的洗脱剂,目的是使其膨胀在正确比例的洗脱剂中。
(3)样品处理:
用尽量少的洗脱剂溶解样品,常压过滤。
(4)湿法上柱:
这也是要有技巧的步骤。
(5)洗脱:控制流速,一般1drop/s以下,可参见厂家的一些参数;必要时更改极性(很多时一个极性就可以将样品洗脱完毕)。
(6)再生以备下次使用。
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- 2004-11-29 09:23:26
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