分析影响ELISA实验非特异性显色分析

聚苯乙烯ELISA板因为原料的不同和制作工艺的差别，各产品的质量差异很大。溶血标本，红细胞溶解破裂，开释出血红素形成，而血红素中的铁卟啉是过氧化物酶的类似物，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。因此，在选择ELISA试剂盒同时要对其使用的微孔板型号进行认证，评估。试剂盒特异性因素固相载体的选择，ELISA中常用的固相载体有微量滴定板、小珠和小试管三种，以微量滴定板Z为常见。外源性干扰物，经常因样品采集、贮存、处理不当造成如样品溶血，被细菌污染，标本凝集不全等。如在冰箱中保留过久，其中的IgG可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。但因为受方法学及技术前提的限制，在酶联吸附测定中有时不可避免的会泛起一定的非特异性，但我们可以通过以上措施把非特异性显色降至Zdi限底，从而进步检测的特异性，并得到更正确、可靠的实验结果。酶联免疫吸附试验（ELISA）自1971年自问世以来，以其敏感性高，特异性强，操纵简便、安全，而广泛应用于临床诊断，开创了免疫学诊断的新纪元。

综上所述，因为酶联免疫吸附技术目前在技术上缺乏尺度化，尽管目前国际上以及我国有了部门尺度血清或参比血清（血清盘）。因此，血标本在采集处理时应小心，在冰箱中保留不易过久。在酶联免疫测定尤其是间接ELISA中，试剂的特异性取决于使用抗原的纯度。ELISA试剂盒标本凝集不全时，血清中会残留部门纤维蛋白原，也易造成假阳性。检修标本中含有酶标记物的干扰物，内源性干扰物类风湿因子（RF）、黄疸等，类风湿因子是可作用于多种动物以及人IgGFc段的自身抗体，多数为IgM类，能充当抗原成分与固相及酶标抗体反应，从而呈现非特异性显色。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP（辣根过氧化酶），有海内报道酶免HBsAg试剂检测溶血标本时可造成假阳性。影响ELISA中非特异性显色的原因良多，如ELISA试剂盒特异性、检修标本中含酶标记物的干扰物，操纵过程中的题目。黄疸血标本中常含有内源性过氧化物酶，如用辣根过氧化物酶为标记物，就有可能产生非特异性显色。

目前因为技术前提的限制，包被用抗原或抗体的纯度不可能达到1**%，所以有些非特异性显色不可避免，只能尽可能进步纯度，进步特异性。它具有良好的吸附机能，孔底透明度高，空缺值低，各板之间、统一板各孔之间机能相近。ELISA试剂盒但同其它免疫诊断方法一样酶免试剂在它的研究、出产及使用中经常会遇到非特异性题目，本文就在实验过程中产生的一些原因及如何采取一些措施，消除非特异性显色作一分析。本文就这一原因作一扼要分析，以便可以通过以上措施把非特异显色降至Zdi限度，从而进步检测的特异性，并得到更正确、可靠的实验结果。

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