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- 【导读】 在elisa试剂盒实验中,酶标板是所需设备之一,有着重要作用。今天我司为您解析ELISA酶标板的三大分类,根据酶标板与蛋白和其它分子结合能力的不同,可以分为:一、氨基化:...
在elisa试剂盒实验中,酶标板是所需设备之一,有着重要作用。今天我司为您解析ELISA酶标板的三大分类,根据酶标板与蛋白和其它分子结合能力的不同,可以分为:
一、氨基化:这种酶标板经表面改性处理后拥有带正电荷的氨基,其疏水键由亲水键取代。该类酶标板适合作为小分子蛋白的固相载体。使用合适的缓冲液和pH值,其表面可通过离子键与带负电荷的小分子结合。由于其表面的亲水特性和可通过其它交联剂共价结合的能力,可用于固定溶于Triton-100、Tween20等去污剂的蛋白分子。该类板的缺陷为由于降低了疏水性,一部分蛋白分子无法结合;此外,其表面需有效地封闭。由于亲水和共价的表面特性,使用的封闭液必须能够与非反应性氨基基团和所选择的交联剂中任何功能基团发生作用。
二、中结合力:此类酶标板经表面疏水键被动与蛋白结合,适合作为分子量>20kD的大分子蛋白的固相载体,其蛋白结合能力为200~300ngIgG/cm2。由于该类酶标板所具有的仅与大分子结合的特性,适用于作为未纯化抗体或抗原的固相载体,可降低潜在的非特异叉反应。该类板可以惰性蛋白或非离子去污剂作为封闭液。
三、高结合力:此种酶标板,表面经处理后,其蛋白结合能力大大增强,可达300~400ngIgG/cm2,主要结合的蛋白分子量>10kD。使用该类酶标板可提高敏感性,并可相对减少包被蛋白的浓度和用量,不足之处为较易产生非特异性反应。抗原或抗体包被后,以非离子去污剂无法有效地封闭未结合蛋白的部位,需使用蛋白作为封闭剂。
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- 2004-07-23 16:27:07
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