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在这些研究中往往需要用到纯化的细胞因子,来刺激体外培养的细胞或者作为ELISA实验中的阳性对照。现在市面上有大量的细胞因子可供选择,我们可以方便地在各大供应商的网站上进行搜索。那么如何才能从中选到Z适合的蛋白产品呢,以下四个方面不可忽视。
蛋白的来源有些蛋白需要经过翻译后修饰才具有活性,哺乳动物细胞可以提供这样的修饰,但细菌细胞往往不能。因此,在选购这类蛋白时应该特别留意产品说明书中的蛋白来源。例如,R&D公司的人TGF-beta1蛋白是在ZG仓鼠卵巢细胞中制备的,其人CCL2蛋白则是在大肠杆菌E.coli中制备的。而InvivoGen公司的重组人IL-4蛋白是在酵母中制备的。 蛋白的形式重组生长因子通常有两种形式:含牛血清白蛋白BSA或不含BSA(通常标有“carrier-free”),选择哪一种完全取决于实验的需要。据eBioscience公司的资料介绍,BSA是一种稳定剂,含BSA的蛋白可以作为ELISA实验中的理想标准品。而当BSA可能影响实验结果时可以采用不含BSA的蛋白,carrier-free形式的蛋白尤其适用于活体实验。 生物活性和应用不论买什么,选择质量放心的产品总没错。声誉好的公司会对其蛋白产品进行各种质控,以确保蛋白的品质和实验效果。他们往往会在说明书中提供蛋白纯度、内毒素含量、SDS-PAGE结果图等多种数据。 在选择蛋白产品时生物活性也是需要考虑到的因素。举例来说,R&D公司用趋化因子CCL2处理转染了人CCR2A的BaF3小鼠pro-B细胞和培养了两日的人类单核细胞,以此衡量CCL2的趋化能力。而eBiosciences用TGF-beta1来YZIL-4诱导的HT-2细胞增殖,从而检测TGF-beta1的生物活性。- 2004-07-23 16:27:07
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