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- 【导读】转化细胞培养在有胶原的底物上可能利于生长,另外人或小鼠表皮在以3T3细胞为饲养层(用射线照射后)时,细胞易生长并可发生一定程度的分化现象。降低PH、Ca2含量和温度,向培养基中加入...
转化细胞培养在有胶原的底物上可能利于生长,另外人或小鼠表皮在以3T3细胞为饲养层(用射线照射后)时,细胞易生长并可发生一定程度的分化现象。降低PH、Ca2含量和温度,向培养基中加入表皮生长因子,均有利于表皮细胞生长。
以表皮细胞为例,用皮肤表皮和分离培养法可获得纯上皮细胞,方法如下:
1、取材:外科植皮或手术残余皮肤小块,早产流产儿皮肤更好,去角化层薄者,切成0.5-1平方厘米小块。
2、置0.02%EDTA中,室温,5分钟。
3、换入0.25%胰蛋白酶中,4摄氏度过夜。
4、分离:取出皮块,用血管钳或镊子将表皮与层分开。
5、取出表皮,剪成更小的块后,置0.25&胰酶中,37摄氏度,30-60分钟。
6、反复吹打,制成悬液。
7、培养:用80目不锈钢纱网滤过后,低速离心,吸去上清。
8、直接加入培养基细胞悬液,转化细胞接种入培养瓶,CO2温箱培养。主要的客户是医学院校,做实行面向的种属重要是人,大鼠和小鼠,如今市面市情上鸡、牛、马、羊、兔种种指标的盒子都有售,真不知道这些抗体是怎么来的。据我所相识,这些炎症指标依然有很大种属特异性的。
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- 2005-01-30 09:23:04
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