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- 【导读】1.贴附型这类肿瘤细胞在培养时,能贴附在支持物表面生长。大多数培养细胞呈贴附型生长;只赖于贴附才能生长的细胞称贴附型细胞或锚着依存型细胞。关于细胞的贴附过程和机制将另加叙述。当单细...
1.贴附型
这类肿瘤细胞在培养时,能贴附在支持物表面生长。大多数培养细胞呈贴附型生长;只赖于贴附才能生长的细胞称贴附型细胞或锚着依存型细胞。关于细胞的贴附过程和机制将另加叙述。当单细胞贴附在支持物上后,易失去它们在体内时原有的特征,细胞分化现象常变得不显著。在形态上常表现单一化的现象,并常反映其胚层起源,呈现类似前述返祖现象。如来源于内、外胚层的细胞多呈上皮细胞型;来自中胚层的细胞则易呈成纤维细胞型(这种现象又与供体的年龄有密切的关系,原供体越幼稚则“返祖”越明显);显然与细胞分化有关。由于上述原因,体外培养细胞形态常表现有一般化的倾向。因此在判定细胞形态时,很难再按体内细胞标准确定,仅能大致作如下分类。
(1)成纤维细胞型:本型细胞因形态与体内成纤维细胞的形态相似而得名:细胞体呈梭形或不规则三角形,ZY有卵圆形核,胞质向外伸出23个长短不同的突起。细胞在生长时多呈放射状、火焰状或漩涡状走行:除真正的成纤维细胞外.凡由中胚层间充质起源的组织.如心肌、平滑肌、成骨细胞、血管内皮等常呈本类形态。另外在培养中的细胞凡形态与成纤维细胞类似时,皆可称为成纤维细胞。因此组织培养中的成纤维细胞一词是一种习惯上的称法.此点与体内细胞不同。
(2)上皮细胞型:本型细胞具有扁平不规则多角形,中有圆形核.细胞紧密相连成单层膜:细胞增殖数量增多时,整块上皮膜随之移动;处于上皮膜边缘的细胞多与膜相连,很少脱离细胞群单独活动。起源于内、外胚层细胞如皮肤表皮及其衍生物、消化管上皮、肝、胰和肺泡上皮等组织培养时,皆呈上皮型形态。上皮型细胞生长时,尤其是外胚层起源的细胞.细胞之间常出现所谓拉网现象,即在构成上皮膜状生长的细胞群中一些细胞常相互分离卷曲,致使上皮细胞膜中形成网眼状空洞。拉网的形成可能与细胞分泌透明质酸酶有关。
(3)游走细胞型:本型细胞在支持物上散在生长.一般不连接成片。细胞质经常伸出伪足或突起,呈活跃的游走或变形运动.速度快而且不规则。此型细胞不很稳定,有时亦难和其他型肿瘤细胞相区别。在一定条件下,由于细胞密度增大连接成片,可呈类似多角形,或因培养基化学性质变动等,也可能变成成纤维细胞形态。
(4)多形细胞型:除上述三型细胞外,还有一些组织和细胞,如神经组织的细胞等,难以确定它们规律的形态,可统归人多形型细胞。
2.悬浮型
有的细胞在培养时不贴附于支持物上,而呈悬浮状态生长。如某些癌细胞和血液白细胞可呈悬浮型。细胞悬浮生长时.胞体为圆形,观察时不如贴附型方便。其优点是细胞悬浮在培养液中生长。生存空间大.允许长时间生长.能繁殖大量细胞。便于做细胞代谢等研究。
对组织培养细胞形态的分类,主要根据细胞在培养中的表现以及描述上的方便而定。当细胞处于较好的培养条件时.形态上有相对的稳定性.在一定程度上能反映细胞的起源,正常和异常(恶性)也可能区别开来,故可作为判定细胞生物学性状的一个指标或依据。但必须意识到.培养细胞的一般形态.并不是一项很可靠的指标.原因是它可受很多因素的影响而发生改变,当培养条件发生变化.如反复开关培养箱.不但影响温度.使之波动,还能放出培养箱内的CO2,使培养基呈碱性。还有支原体污染、培养基pH改变等都可使细胞形态发生变化。如HeLa细胞原本属于上皮型,但在过酸或过碱的情况下可变成梭形,pH适宜时又可恢复。从细胞接种到细胞密度增大的一代生长过程中。细胞形态表现也有所不同,如上皮型细胞在刚接种后不久,因细胞数量较少,细胞可能呈星形或三角形。只有当细胞数量增多后,多角形态特点和上皮膜状结构才逐渐变得明显起来。另外贴附型和悬浮型细胞性质也不是一成不变的;在一定条件下,悬浮型细胞可呈贴附状生长,贴附型细胞也可呈悬浮状生长。当细胞发生转化后,细胞形态变化更大;成纤维细胞转化后可变成上皮形态。另外在一些类型相同的细胞之间,如癌细胞等.也很难在形态上看出有什么明显区别。
由于培养肿瘤细胞形态的易变性.在利用形态学指标判定细胞类型和其他一些性状时应持谨慎态度。不应仅仅依赖光学显微镜观察的结果.必要时须做超微结构和其他方法的分析,如电镜下观察到桥粒时,可确认为上皮型细胞,因桥粒是上皮细胞所特有的结构.但在光镜下不可见,只有在电子显微镜下才能观察到。因此电子显微镜所提供的形态学依据显然更为可靠。
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- 2005-01-30 09:23:05
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