ELISA试剂盒各步骤优化以及注意事项

ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。ELISA试剂盒结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。那么我们在做ELISA实验的时候要如何优化各个步骤以及需要注意一些什么呢?

ELISA试剂盒加样的各步优化：
A、一般情况下有三次加样，它们分别是加标本，加酶结合物，加底物。
B、冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下倒置混和，不要在混匀器上强烈振荡。
C、制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清天然凝固、收缩后即可取得。D、也可在板孔中加入稀释液，再在其加入血清标本，然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。
E、一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。

ELISA试剂盒应注意的实验规则：
A、酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋，未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。
B、实验操作时需戴手套、穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度，各种实验废弃物都应按传染物处理。
C、终止液具有腐蚀性，应避免接触皮肤和衣物，如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。
D、浓缩洗涤液在低温时容易结晶，使用时需恢复至室温以完全溶解。
E、洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。
F、用于检测的样品应保持新鲜。
G、试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
H、不同批号试剂组分不得混用。

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