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- 【导读】液相色谱仪的日常维护与注意事项一、日常维护:1.定期清洗单向阀:将单向阀卸下,一般先用纯净水超声10分钟,然后用异丙醇超声,10分钟;也可直接用异丙醇超...
液相色谱仪的日常维护与注意事项
一、日常维护:
1.定期清洗单向阀:将单向阀卸下,一般先用纯净水超声10分钟,然后用异丙醇超声,10分钟;也可直接用异丙醇超声10分钟。
2.定期清洗吸滤头:将吸滤头卸下,一般先用纯净水超声10分钟,然后用异丙醇超声10分钟;也可直接用异丙醇超声10分钟。
3.定期冲洗检测池:把色谱柱卸下,在流速1.0ml/min的状态下先用纯净水冲洗30分钟,然后再用30%
磷酸(色谱级)冲洗30分钟左右,再用超纯水冲洗至流出液为中性,Z后用甲醇冲洗,待用。
二、注意事项:
1.开始进样前30分钟开氘灯即可,节约灯的能量和使用时间。
2.流动相的使用和注意事项:
①所用流动相必须预先滤过和脱气,流动相一般贮存于玻璃不锈钢容器内。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成变化。磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉,应尽量新鲜配制使用,不要长期贮存。容器应定期清洗,特别是盛水、缓冲液和混合溶液的瓶子,以除去底部的杂质沉淀和可能生长的微生物。
②配制流动相用水需为娃哈哈牌纯净水或经超声过滤后的纯化水,流动相配制好后先用直径为5cm,孔径为0.45um的滤膜,通过沙芯过滤器的过滤,然后在超声仪上超声。
③不得将装流动相的容器直接放置与超声仪内,需放与筛网上进行超声。
3.六通阀的使用和维护注意事项:
①样品溶液进样前必须用滤膜过滤,以减少微粒对进样阀的磨损。
②转动阀芯时不能太慢,更不能停留在中间位置,否则流动相受阻,使泵内压力剧增,甚至超过泵的Zda压力;再转到进样位时,过高的压力将使柱头损坏。
③为防止缓冲盐和样品残留在进样阀中,每次分析结束后应冲洗进样阀。通常可用水冲洗,或先用能溶解样品的溶剂冲洗,再用水冲洗。
4.色谱柱柱压升高的主要因素:
①LC-10AT/20AT/10ATPlus泵的单向阀堵塞。
②色谱柱的入口筛板堵塞。
③吸滤头堵塞。
④PEEK管接口处堵塞。
5.色谱柱柱压不稳的因素:
①泵内有空气。
②泵密封垫损坏。
③溶剂中的气泡。
④系统检漏,找出漏点。
6.样品峰保留时间漂移的主要因素:
①室内温度变化过大。
②流动相成分发生变化。
③色谱柱未平衡好。
④泵中有气泡。
⑤该流动相是否适宜此样品的检测。
7.基线漂移的主要因素:
①柱温波动。
②流动相不均匀。
③流通池被污染或有气体。
④检测器出口阻塞。
⑤流动相配比不当或流速变化。
⑥流动相污染、变质。
⑦使用循环溶剂。
8.检测器灵敏度不够的主要因素:
①样品进样量不足。
②波长设置不正确。
③检测器池窗污染。
④检测池中有气泡。
⑤电压不稳。
⑥流动相流速不合适。
9.色谱柱的使用和维护注意事项:
①避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。
②应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。
③一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
④选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。
⑤避免将复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。
⑥经常用强溶剂冲洗色谱柱,清除保留在柱内的杂质。
⑦保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。禁止将缓冲溶液留在柱内静置至次日或更长时间。
⑧色谱柱使用过程中,如果压力升高,一种可能是滤片被堵塞,这时应更换滤片或将其取出进行清洗;另一种可能是大分子进入柱内,使柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形,则可能柱头出现塌陷,死体积增大。
⑨以硅胶为基质的填料,只能在pH2~9范围内使用。每次分析检测完成后,Z好用洗脱能力强的洗脱液冲洗,例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡。
10.样品必须用直径为2.5cm,孔径为0.45um的滤膜针式过滤。如有明确要求需用离心过滤的,经离心过滤后取上清液即可。
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- 2006-01-21 09:37:39
- 标签:液相色谱仪
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