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固相萃取原理及操作步骤
北京华盛谱信仪器有限责任公司
固相萃取主要通过目标物与吸附剂之间的以下作用力来保留/吸附的1)疏水作用力:如C18、C8、Silica、苯基柱等2)离子交换作用:SAX,SCX,COOH、NH2等3)物理吸附:Florsil、Alumina等
pH值对固相萃取的影响
pH值可以改变目标物/吸附剂的离子化或质子化程度。对于强阳/阴离子交换柱来讲,因为吸附剂本身是完全离子化的状态,目标物必须完全离子化才可以保证其被吸附剂完全吸附保留。而目标物的离子化程度则与pH值有关。如对于弱碱性化合物来讲,其pH值必须小于其pKa值两个单位才可以保证目标物完全离子化,而对于弱酸性化合物,其pH值必须大于其pKa值两个单位才能保证其完全离子化。对于弱阴/阳离子交换柱来讲,必须要保证吸附剂完全离子化才保证目标物的完全吸附,而溶液的pH值必须满足一定的条件才能保证其完全离子化。
固相萃取操作步骤及注意事项
针对填料保留机理的不同(填料保留目标化合物或保留杂质),操作稍有不同。
1)填料保留目标化合物
固相萃取操作一般有四步:
活化----除去小柱内的杂质并创造一定的溶剂环境。(注意整个过程不要使小柱干涸)
上样----将样品用一定的溶剂溶解,转移入柱并使组分保留在柱上。(注意流速不要过快,以1ml/min为宜,Zda不超过5ml/min)
淋洗----Zda程度除去干扰物。(建议此过程结束后把小柱完全抽干)
洗脱----用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。(注意流速不要过快,以1ml/min为宜)
2)填料保留杂质
固相萃取操作一般有三步:
活化--除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境。(注意整个过程不要使小柱干涸)
上样--将样品转移入柱,此时大部分目标化合物会随样品基液流出,杂质被保留在柱上,故此步骤要开始收集(注意流速不要过快)
洗脱---用小体积的溶剂将组分淋洗下来并收集,合并收集液。(注意流速不要过快)
此种情况多用于食品或农残分析中去除色素。
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- 2004-07-09 09:55:18
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