- 功能性肠道芯片的 4D 实时成像和计算模型评估蠕动如何促进肠道病原体入侵
- 举办高低温冷热试验箱技术研讨会,皓天推动行业发展
- 中科院上海光机所李青会课题组:科技解锁建盏釉面千年奥秘 | 前沿用户报道
- 和瑞家人“益”起健步走,好City啊!
- 喜报 Sciclone G3 NGSx 系列基因测序文库制备仪获批二类医疗器械注册证
- 学术会议邀请 | 山东省静脉输液治疗护理会议·潍坊
- 邀请函 | 第十四届亚太膜学会(AMS 14)
- 皓天新款高温烤箱干燥箱重磅发布,行业瞩目!
- 35℃低温喷雾干燥技术与有机溶剂喷雾干燥技术将在【第三届MAH大会】大放异彩
- 如何确定尘埃粒子计数器的采样点位?
- 实验室纯水机RO反渗透膜应该如何选择?
- 揭秘高低温试验箱的低能耗运行策略
- 恒温恒湿试验箱:压缩机的核心技术
![上海长方光学仪器有限公司](http://yiqi-oss.oss-cn-hangzhou.aliyuncs.com/aliyun/Manage/2018-07-06/20180706-2055212137.jpg)
- 来源:内容来源于网络 浏览量:2615次
- 【导读】 【关键词】 脑力智宝 脑缺血 学习记忆 细胞凋亡 1.1 动物 健康Wistar大鼠,体重220~250 g,雌雄各半,广州中医药大学实验动物中心提供。仪器Morris
【摘要】 目的研究脑力智宝对实验性脑缺血大鼠学习记忆功能与神经细胞凋亡的影响。方法结扎实验大鼠双侧颈总动脉制作脑缺血模型,Morris水迷宫法测试其学习记忆功能,HE染色法观察其神经细胞形态学改变,TUNEL法检测凋亡细胞。结果脑力智宝能显著缩短实验性脑缺血大鼠的逃避潜伏期,增加跨越原平台位置的次数;显著减少顶叶皮层及海马CA1区凋亡细胞的数量。结论脑力智宝对脑缺血损伤所致学习记忆功能减退具有改善作用,可能与其能减少神经细胞凋亡有关。
【关键词】 脑力智宝 脑缺血 学习记忆 细胞凋亡
脑力智宝用于ZL精神发育迟滞、脑瘫、脑血管病后遗症、脑外伤后遗症、脑炎后遗症、老年性痴呆等脑病伴发的智力和肢体功能障碍,具有一定的LX。临床研究表明脑力智宝能明显改善脑梗塞后遗症患者运动、语言及精神方面的症状。离体细胞研究表明脑力智宝及其含药血清可能通过促进Bcl-2蛋白的表达、增加细胞膜流动性等途径对硝普钠诱导的PC12细胞凋亡具有保护作用。本实验观察了脑力智宝对实验性脑缺血损伤大鼠学习记忆功能与神经细胞凋亡的影响,旨在阐明脑力智宝用于ZL脑缺血损伤性疾病后遗症的机理。
1 材料与方法
1.1 动物 健康Wistar大鼠,体重220~250 g,雌雄各半,广州中医药大学实验动物ZX提供。
1.2 药物与仪器 脑力智宝由广东高明脑病YL医药研究院提供,制备成1 g生药/ml供试液,灌胃前按所需浓度稀释。尼膜同(尼莫地平,nimodipine, Nim)片剂,德国拜耳公司产品,批号CAGFT3。TUNEL法凋亡细胞检测盒,德国宝灵曼公司(BOEHRINGER MANNHEIM)产品,Morris水迷宫(SuperMaze动物行为学分析系统)由上海欣软信息科技有限公司提供。
1.3 脑缺血损伤致学习记忆障碍模型的制备大鼠经10%乌拉坦1 g/kg腹腔注射麻醉后,仰卧位固定,行颈正中切口,分离双侧颈总动脉,用丝线结扎,缝合皮肤。假手术组大鼠同法分离双侧颈总动脉,但不结扎。脑力智宝对实验性脑缺血大鼠学习记忆与神经细胞凋亡的影响
1.4 分组与给药 将造模成功动物随机分为4组:模型组、尼莫地平组、脑力智宝小剂量组与脑力智宝大剂量组,每组8只,雌雄各半。假手术组大鼠8只,雌雄各半。待大鼠苏醒后,尼莫地平组按12 mg/kg灌胃给予尼莫地平混悬液;脑力智宝不同剂量组分别按小剂量4 g/kg、大剂量8 g/kg灌胃给予脑力智宝供试液;假手术组和模型组分别给予等容量生理盐水,1次/d,连续30 d。
1.5 Morris水迷宫测试 各组大鼠在药物干预结束后开始水迷宫测试。水迷宫由直径130 cm,高50 cm圆形水池组成,水深30 cm,水温(26±1)℃,在水池壁标明4个入水点,由此将水池分为4个象限,任选一象限,正中放一个直径12 cm,高29 cm的平台,没于水下1 cm,水面覆盖泡沫塑料。测试包括:①定位航行实验:历时6 d,分别从4个不同的标记入水点,将大鼠面向池壁放入水中,记录在120 s内寻找平台所需的时间(逃避潜伏期)。若大鼠入水后120 s内未能找到平台,则将其置于平台上并停留15 s,逃避潜伏期记录为120 s。②空间探索实验:定位航行实验结束后,撤除平台,任选一个入水点将大鼠面向池壁放入水中,记录120 s内跨越原平台位置的次数。
1.6 脑组织形态学观察 将进行学习记忆能力测试后的大鼠麻醉下处死,快速断头取脑,浸泡于10%中性甲醛液中固定。切片进行HE染色,光镜下观察拍片。普通光镜400×倍下计数海马CA1区锥体细胞层500 μm范围内核完整椎体细胞数目与顶叶皮层每个视野下核完整神经细胞数目,每张切片计数5个不重叠视野。
1.7 原位细胞凋亡检测 切片经脱蜡、水洗、蛋白酶K消化、TUNEL反应,按试剂盒指示常规操作。光镜下观察拍片,普通光镜400×下计数海马CA1区锥体细胞层500 μm长范围内凋亡细胞数目与顶叶皮层每高倍视野下凋亡细胞数目,每张切片计数5个不重叠视野。
1.8 统计学处理 实验数据用±s表示,运用统计软件SPSS11.0 for windows 11.5 进行重复测量方差分析与单因素方差分析。
2 结果
2.1 定位航行实验结果 在定位航行实验中,随着训练次数的增加,各组大鼠的平均逃避潜伏期总体呈逐渐下降趋势,但下降的速率不一致,各组大鼠平均逃避潜伏期的比较见图1。第1,4,5,6天,模型组平均逃避潜伏期较假手术组明显延长(P<0.01)。与模型组比较,尼莫地平组第5,6天平均逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),脑力智宝小剂量组第1,4,5,6天平均逃避潜伏期明显缩短(P<0.05或 P<0.01),脑力智宝大剂量组第1,2,4,5,6天平均逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),而与假手术组比较差异无显著性(P>0.05)。
图1 各组大鼠平均逃避潜伏期比较脑力智宝对实验性脑缺血大鼠学习记忆与神经细胞凋亡的影响
2.2 空间探索实验结果 在第7天的空间探索试验中,模型组大鼠多在平台所在的象限外游泳,而其他组大鼠运动轨迹多位于原平台所在象限,各组大鼠跨越原平台位置的次数比较见表1 。与假手术组比较,模型组大鼠跨越原平台位置次数明显减少( P<0.01) ;尼莫地平组、脑力智宝小剂量组和大剂量组大鼠跨越原平台位置次数较模型组明显增加(P<0.01)。表1 各组大鼠在空间探索试验中跨越原平台位置的次数
2.3 脑组织形态学观察 模型组大鼠大量神经细胞坏死或严重皱缩,体积变小,胞核与胞浆界限不清,血管、神经元及胶质细胞周围间隙扩大。各给药组大鼠坏死神经细胞显著减少,零星可见一些损伤细胞,海马椎体细胞层细胞形态、排列基本正常。见图2~9。各组大鼠顶叶皮层与海马CA1区核完整神经细胞数量比较结果见表2。与假手术组比较,模型组顶叶皮层与海马CA1区核完整神经细胞数量显著减少(P<0.01);与模型组比较,尼莫地平、脑力智宝小剂量与大剂量均能显著改善不完全脑缺血所导致的神经细胞坏死与丢失(P<0.05或P<0.01)。
2.4 TUNEL法检测凋亡细胞结果 不完全脑缺血损伤30 d后,脑组织中已有大量凋亡细胞出现,阳性细胞表现为棕黄色,阴性细胞为淡蓝色。凋亡细胞有的呈散在分布,也有呈灶状分布,可能系坏死灶。各组大鼠顶叶皮层与海马CA1区凋亡细胞数量比较结果见表3。与模型组比较,尼莫地平、脑力智宝小剂量与大剂量均能显著减少不完全脑缺血损伤后顶叶皮层及海马CA1区的凋亡细胞数量(P<0.05或P<0.01)。表2 各组大鼠顶叶皮层与海马CA1核完整神经细胞数量的比较 各组大鼠顶叶皮层与海马CA1凋亡细胞数量的比较
3 讨论
大鼠双侧颈总动脉**性结扎能造成学习记忆障碍,是一种简便易得、比较理想的研究脑缺血后神经损伤及智能障碍的动物模型。脑缺血后以神经元为主的细胞凋亡是缺血性脑损伤中重要的病理生理过程,其特点是主要分布在脑梗塞的边缘区域,多为迟发性,干预缺血后凋亡过程有助于ZL脑缺血性损伤。
脑力智宝主要由当归、红花、远志、石菖蒲、黄精、YZ仁、龟甲、枸杞子、核桃仁等组成。方中当归、红花养血HX,破淤散结;石菖蒲、远志化痰开窍;黄精、YZ仁益气健脾;龟甲、枸杞子、核桃仁平补肾阴肾阳,益髓填精。现代药理研究资料表明,当归能YZBax蛋白的表达,减少脑缺血区细胞凋亡的发生;红花可以减少脑梗塞体积,在脑缺血损伤急性期可增加神经元凋亡相关蛋白bcl-2的表达而减少Caspase-3的表达;远志、黄精、YZ仁能够改善学习记忆功能;石菖蒲可通过增强突触可塑性,改善痴呆大鼠的学习记忆功能,石菖蒲挥发油可以有效YZ脑缺血-再灌注后兴奋性氨基酸Glu、Asp、GABA含量的异常升高,YZ大鼠脑皮质和海马神经细胞Bax基因表达,增强Bcl-X基因的表达,从而YZ大鼠神经细胞凋亡,减轻神经细胞的损伤。
本研究表明在双侧颈总动脉结扎致脑缺血损伤30 d后,模型组大鼠学习记忆功能减退,大量神经细胞坏死、凋亡。经脑力智宝ZL的脑缺血损伤大鼠则学习记忆功能显著改善,凋亡细胞显著减少。既往研究表明脑力智宝可以通过抗氧化作用、Ca2+拮抗作用、促进Bcl-2蛋白的表达和调节细胞膜的流动性,从而YZNO诱导的PC12细胞凋亡。因此,脑力智宝拮抗脑缺血损伤后神经细胞凋亡的机制可能与其YZ兴奋性氨基酸与NO的神经毒性作用、调控凋亡相关基因的表达有关。减轻脑缺血损伤后神经细胞凋亡,可能是脑力智宝改善脑缺血损伤大鼠学习记忆障碍的机制之一。本研究为脑力智宝用于ZL脑缺血损伤性疾病后遗症提供了实验依据。
仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
相关热词:
金相分析仪,油品分析仪,针焰试验仪,液位传感器,土壤测试仪,高效液相色谱仪价格,霉菌试验箱,跌落试验台,离子色谱仪价格,噪声计,集菌仪,接地电阻测试仪型号,柱温箱,旋涡混合仪,电热套,场强仪万能材料试验机价格,洗瓶机,匀浆机,耐候试验箱,熔融指数仪,透射电子显微镜。
- 2006-10-06 11:43:02
- 标签:
- 收藏(0) 赞(0) 踩(0)
-
随时了解更多仪器资讯,求购、招标、中标信息实时更新,厂商招商信息随时看。大量、齐全、专业的仪器信息尽在仪器网(yiqi.com)。扫一扫关注仪器网官方微信,随时随地查看仪器用户采购、招标需求!
-
细胞凋亡-DNA Ladder抽提试剂盒2004-07-13 09:31:27
细胞凋亡-DNALadder抽提试剂盒 细胞凋亡-DNALadder抽提试剂盒产品编号产品名称包装C
-
TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒说明书2004-07-13 09:31:27
(通用)(BIOTIN标记POD法,适用于细胞、组织样本)一TUNEL检测原理TUNEL细胞凋亡检
-
Annexin V法细胞凋亡检测原理2004-07-23 16:27:07
AnnexinV法细胞凋亡检测原理 磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)正常
-
ELISA法细胞凋亡检测操作步骤2004-07-23 16:27:07
细胞凋亡的发生是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp~200bp或其倍
-
细胞凋亡的形态学检测2004-07-25 09:29:06
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。1、光学显微镜和倒置显
-
CCCP 细胞凋亡诱导剂 CAS:555-60-2使用说明2004-08-16 09:23:04
CCCP(50mM)细胞凋亡诱导剂CAS:555-60-2使用说明品牌:Solarbio货号:C6700CA
-
一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC)产品简介2004-08-16 09:23:04
一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC)产品简介货号:CA1040规格:25T/50T保存:-20℃保
-
细胞凋亡荧光双染试剂盒产品简介2004-08-16 09:23:04
细胞凋亡荧光Hoechst33342/PI双染试剂盒产品简介货号:CA1120规格:100T保存:4℃保存六
-
小分子激动剂YZ剂之细胞凋亡通路2004-08-23 09:23:04
细胞凋亡为一种程序性细胞死亡(PCD),通常表现为有不同的形态特征和能量依赖的生物化学机制。细胞凋亡的作用机
-
细胞凋亡检测操作步骤之ELISA法2004-08-30 09:23:16
细胞凋亡发生时,内源性核酸内切酶将分解核小体区间的双链DNA,但核小体本身由于由组蛋白紧密结合而免受切割,单
脑力智宝对实验性脑缺血大鼠学习记忆与神经细胞凋亡的影响
-
您可能感兴趣
![](https://static.yiqi.com/Pingce/img/imgddd.png)
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布,观点仅代表作者本人,不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们立即通知作者,并马上删除。
②凡本网注明"来源:仪器网"的所有作品,版权均属于仪器网,转载时须经本网同意,并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱:hezou_yiqi