Agela Venusil AA HPLC法测定"皮革奶"中羟脯氨酸

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【导读】　　方法摘要：　　Venusil AA 氨基酸分析的原理为目前广泛使用的PITC(异硫氰酸苯酯)衍生法。经过简化后的衍生方法有很多优点：方便、快速;衍生物单一、稳定，-20℃可贮存

　　方法摘要：

　　Venusil AA 氨基酸分析的原理为目前广泛使用的PITC(异硫氰酸苯酯)衍生法。经过简化后的衍生方法有很多优点：方便、快速;衍生物单一、稳定，-20℃可贮存数月;采用Venusil AA 柱分析时间短;结果准确;试剂、副产物、溶剂等多种干扰因素可通过快速萃取去除;紫外检测(254nm)灵敏度高。

　　样品：

　　取某品牌牛奶0.5g，按照博纳艾杰尔氨基酸分析方法包进行水解衍生，并取混合氨基酸标准溶液(准确量取氨基酸标准溶液1.0 mL，置于5mL容量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液定容至刻度)加内标正亮氨酸，然后进行衍生。(异硫氰酸苯酯为衍生剂)

　　色谱柱：Agela Venusil AA，4.6×250mm，5µm，100Å(订货号：VA952505-K)

　　流动相：A：称取15.2g无水醋酸钠，加水1850mL，溶解后用冰醋酸调pH至6.5，然后加乙腈140mL，混匀，用0.45µm滤膜过滤。

　　B：80%(V/V)乙腈溶液

　　时间流动相A

　　0 0

　　2 0

　　15 10

　　25 30

　　33 45

　　33.1 100

　　39 100

　　39.1 0

　　45 0

　　流速：1.0mL/min

　　进样体积：10μL

　　温度：40℃

　　波长：254nm

　　Agela Venusil AA HPLC法测定牛奶中羟脯氨酸混和标准品图谱 (6.50min为羟脯氨酸)

　　Agela Venusil AA HPLC法测定牛奶中羟脯氨酸图谱(6.51min为羟脯氨酸)

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2006-10-06 13:23:28

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