超声波细胞粉碎仪的常见问题

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【导读】一、问：链霉菌超声破碎的，用的方法条件是什么？答：前处理一般就是配置成一定浓度的菌悬液。使用超声波细胞粉碎仪进行超声破碎时采用的具体条件是： 1、取细菌的 24 h 培养液于 ...

一、问：链霉菌超声破碎的，用的方法条件是什么？

答：前处理一般就是配置成一定浓度的菌悬液。使用超声波细胞粉碎仪进行超声破碎时采用的具体条件是：

1、取细菌的 24 h 培养液于 5 000 r／min 下离心 5 min 收集菌体．

2、用 pH 7．5 的 Na2HPO -NaH2PO 缓冲液洗涤 3 次，再用该缓冲液将菌体配成 1： 3 的菌悬液．置于 40 mL 大塑料试管内．

3、将大塑料试管置于冰浴中，采用超声波破碎（功率 200 W，1／2”探头，破碎 30 s，间歇 30 S）．

4、破碎液于 12 000 r／min下高速冷冻离心 30 min，收集细胞碎片和上清液，超声破菌流程与上述基本一致，就是洗涤菌体也可以用预冷的生理盐水或 pH8 的 Tris－HCl，洗涤一次就可以。另外超声剂量随样品量、菌体改变比较大，功率可以到 400－600w，超 5s，停 5s，冰浴，要加终浓度 1 mM 的 PMSF。为确定合适的超声强度和次数，有必要随时镜检观察菌体是否完全破碎。放线菌属于原核生物系统进化树上的（G＋C）摩尔百分含量（mol％）高的革兰氏阳性菌分枝类群。在做大肠杆菌超声时，采用的是 400W超声波细胞粉碎仪，超5停5的方法，效果不错，但是用在链霉菌上，似乎没什么效果。会不会就是由于细胞壁组成差异造成的呢，因为大肠杆菌式属于革兰氏阴性菌的。

二、超声波细胞粉碎仪结构上有啥特点？

超声波细胞粉碎仪的主要特点有一下几个方面：

1、超声波细胞粉碎仪可储存5个控制模式。

2、定时数字显示，输出能量由光条显示，0～1**%连续可调，操作直观方便。

3、超声波细胞粉碎仪工作方式有间断和连续两种选择，间断工作时，脉冲宽度和间断时间可分别设定。

4、工作时间可由数字定时器控制，达到预定时间自动转变为待机状态，定时范围1min～99min。

5、手持式超声波细胞粉碎仪可人为自由控制工作和截止时间，使用灵活方便，适用于少量样品的处理工作。

文章由先欧超声波细胞破碎仪提供

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2004-08-03 09:01:54

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