液相色谱柱的使用和维护

在日常分离分析工作中，色谱柱的正确使用和维护十分重要，色谱柱使用是否得当，直接影响色谱柱的寿命，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操纵过程中，需要留意下列题目，以维护色谱柱。(1)柱子在装卸、更换时，动作要轻，接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动，以免柱床产生空隙。(2)假如仪器用来做常规分析，样品种类有限，但分析次数多，则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱，这样有助于延长柱子的寿命。(3)避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的忽然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的忽然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。(4)应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。(5)如使用柱温控制装置时，应留意在通人活动相后才能升温。(6)一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除往留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。(7)选择使用适宜的活动相，以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一个预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使活动相在进进分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。8)避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注人柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。(9)经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保存在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中活动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种活动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50-75mL。(10)保存色谱柱时应将柱内布满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。尽对禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。(11)色谱柱使用过程中，假如压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗;另一种可能是大分子进人柱内，使柱头被污染;假如柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。

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