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- 【导读】高效液相色谱常见问题分析 点击次数:102 发布时间:2015/5/4...
GX液相色谱常见问题分析 点击次数:102 发布时间:2015/5/4
早出的峰变形,原因及其解决方法 一、酸性或碱性化合物的峰拖尾,原因及其解决方法 1、缓冲不合适 a、使用浓度50-100mM的缓冲液 b、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液 二、保留时间波动,原因及其解决方法 1、温控不当 调好柱温2、流动相组分变化 防止变化(蒸发、反应等)3、色谱柱没有平衡 在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱
三、基线漂移,原因及其解决方法 1、柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。) 控制好柱子和流动相的温度,在检测器之前使用热交换器图2、流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。) 使用HPLC级的溶剂,高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气,使用中使用氦气。3、流通池被污染或有气体 用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要,可以用1N的硝酸。(不要用盐酸)4、检测器出口阻塞。(高压造成流通池窗口破裂,产生噪音基线) 取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。5、流动相配比不当或流速变化 更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。6、柱平衡慢,特别是流动相发生变化时 用中等强度的溶剂进行冲洗,更改流动相时,在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂8、样品中有强保留的物质(高K’值)以馒头峰样被洗脱出,从而表现出一个逐步升高的基线。 使用保护柱,如有必要,在进样之间或在分析过程中,定期用强溶剂冲洗柱子。9、使用循环溶剂,但检测器未调整。 重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时,使用新的流动相。10、检测器没有设定在Zda吸收波长处。 将波长调整至Zda吸收波长处 [ 打印 ] [ 返回顶部 ] [ 关闭 ]- 2004-07-10 09:35:14
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