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- 【导读】 人NK细胞流式鉴定操作步骤 1、准备细胞:取培养的细胞离心(300g/5min),弃去上清,加入一定量PBS洗涤一次,弃去上清,弹散细胞,细胞重悬到5×106~10×106之间。...
人NK细胞流式鉴定操作步骤
1、准备细胞:取培养的细胞离心(300g/5min),弃去上清,加入一定量PBS洗涤一次,弃去上清,弹散细胞,细胞重悬到5×106~10×106之间。
2、取100ml的细胞于EP管或流式管内,加入相应的抗体,每个抗体加入5ml(注意人的抗体都是加5ml,小鼠的抗体具体要看说明书),有补偿的要做单染管(若不想调节补偿可以参照以下配色方案)。
3、加入相应的抗体后混匀,建议弹管子,尽量不用枪头直接吹打,室温避光孵育15min,染色过程中再混匀一次。
4、染色完成后加入1ml的PBS洗涤细胞,离心300g/5min。
5、弃去上清,弹散细胞,加入500mlPBS重悬,上机检测。
人NK细胞流式鉴定结果
注意:1、此配色方案荧光颜色之间没有补偿干扰,可一起染色不用设置单染管调节补偿。
2、NK细胞的鉴定标准是CD3-CD16+CD56+,因此本次结果鉴定的NK纯度是96.8%*77%。
3、此鉴定方案Z好有同型对照,特别是CD16和CD56要做同型对照,CD3因分群明显可以省去。
人NK细胞流式抗体产品
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