- 可恶!知识不受控制的进入了我的大脑!
- Dr.赛流式小课堂 | 轻松上手流式染色细胞因子实验
- 小道快讯 | 交付中心技能PK大赛奖项花落谁家
- MP工具箱 | 云学堂:一键开启免费学习平台
- 媒体报道丨国产仪器如何跑赢存量市场?
- 东隆科技诚邀您共赴CIOE 2024深圳光博会,见证光电技术革新!
- 滨松:行“专业公司”应行之事
- 参会指南 | 第一届微纳塑料检测及其标准化学术研讨会
- 8月节日 | 为猫咪、狗狗和流浪动物送上专属礼物
- 实验室磷酸根分析仪有效检测磷酸根含量高低
- Aiculture|探索微生物世界:平板计数琼脂的实用指南
- 火力发电|教科书里的奥立龙在线钠表
- 啤酒色度仪如何检测啤酒色度值?
![上海长方光学仪器有限公司](http://yiqi-oss.oss-cn-hangzhou.aliyuncs.com/aliyun/Manage/2018-07-06/20180706-2055212137.jpg)
- 来源:内容来源于网络 浏览量:935次
- 【导读】人骨成型蛋白7 (BMP-7)ELISA试剂盒说明书 点击次数:40 发布...
人骨成型蛋白7 (BMP-7)ELISA试剂盒说明书 点击次数:40 发布时间:2015/5/5
人骨成型蛋白7 (BMP-7)ELISA试剂盒说明书
人骨成型蛋白7 (BMP-7)酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书 96t
目 的:
本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人骨成型蛋白7 (BMP-7)的含量。
检测范围:
5.0ng/L -100ng/L
实验原理:
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人骨成型蛋白7 (BMP-7)水平。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被抗原的微孔中依次加入人骨成型蛋白7 (BMP-7),再与 HRP 标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP酶的催化下转化成蓝色, 并在酸的作用下转化成Z终的黄色。 颜色的深浅和样品中的人骨成型蛋白7 (BMP-7)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值) ,通过标准曲线计算样品中人骨成型蛋白7 (BMP-7)浓度。
试剂盒组成:
Reagent
Quantity
酶标包被板
12well×8strips
标准品: 480pg/mL
1×0.5ml
标准品稀释液
1×1.5ml
酶标试剂
1×6ml
样品稀释液
1×6ml
显色剂A液
1×6ml
显色剂B液
1×6ml
终止液
1×6ml
30倍浓缩洗涤液
1×20ml×30flod
说明书
1
封板膜
2
密封袋
1
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固 10-20 分钟,离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分) 。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,
离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分) 。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分) 。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右(2000-3000
转/分) 。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分) 。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保
存备用。标本融化后仍然保持 2-8℃的温度。加入一定量的 PBS(PH7.4) ,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分) 。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤:
标准品:其浓度为1,00pg/mL(贮液)。先将其稀释为100pg/mL(标准曲线Zgao浓度)后,再准备5个稀释标准品的EP 管,每个EP 管中加入150μL 的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成100pg/mL, 50pg/mL,25pg/mL, 12.5pg/mL, 6.25pg/mL, 3.12pg/mL,,标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液Tube
0
1
2
3
4
5
pg/mL
1.00
50
25
12.5
6.25
3.12
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 、待
测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μ l,然后再加待测样品 10μ l(样品Z终稀释度为 5 倍) 。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 20 倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,
如此重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μ l,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μ l,再加入显色剂 B50μ l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50μ l,终止反应(此时蓝色立转黄色) 。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值) 。 测定应
在加终止液后 15 分钟以内进行。
注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后
如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间
Z好控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,Z好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD
值大于标准品孔diyi孔的 OD 值) ,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5) 。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,
在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的 OD
值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释
倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值
代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释
倍数,即为样品的实际浓度。
(此图仅供参考)
试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数 R 值为 0.990 以上。
2.批内与批见应分别小于 9%和 11%
3.保存条件及有效期:
a.试剂盒保存:2-8℃。
b.有效期:6 个月
- 2004-07-12 15:05:27
- 标签:
- 收藏(0) 赞(0) 踩(0)
-
随时了解更多仪器资讯,求购、招标、中标信息实时更新,厂商招商信息随时看。大量、齐全、专业的仪器信息尽在仪器网(yiqi.com)。扫一扫关注仪器网官方微信,随时随地查看仪器用户采购、招标需求!
-
人D二聚体(D2D)试剂盒(ELISA) 使用说明书2004-09-12 09:23:03
人D二聚体(D2D)试剂盒(ELISA)使用说明书l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关
-
用检测试剂盒进行定量分析之前,该使用多少样品用于净化和萃取? Megazym2004-08-20 09:23:04
Megazyme酶法食品检测试剂盒FAQs(16)Q:用检测试剂盒进行定量分析之前,该使用多少样品用于净化和
-
人脂肪细胞因子试剂盒(ELISA) 使用说明书2004-09-12 09:23:03
l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人脂肪细胞因子(chemerin)的含量
-
人CD3分子(CD3)试剂盒(ELISA) 使用说明书2004-09-12 09:23:03
l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人CD3分子(CD3)的含量。l有效期:
-
人B细胞淋巴瘤-试剂盒(ELISA) 使用说明书2004-09-12 09:23:03
l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人B细胞淋巴瘤-XL(Bcl-XL)的含
-
人B7同源体1试剂盒(ELISA) 使用说明书2004-09-12 09:23:03
l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人B7同源体1(B7-H1)的含量。l有
-
标准COD消解器 使用说明书 丨说明书下载2004-10-24 09:23:05
LB-101C型COD消解器使用说明书青岛路博伟业环保科技有限公司LB-101C型COD消解器国家GB119
-
人环磷酸鸟苷(ELISA)酶联免疫试验说明书2004-11-24 09:23:08
人环磷酸鸟苷酶联免疫试验(德国IBLCM581021)预期用途此酶免试剂盒用于细胞裂解液,组织,血浆和尿液中
-
人cAMP反应元件结合蛋白(CREB)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书2004-11-27 09:40:25
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。人cAMP反应元件结合蛋白(CREB)定量检测试剂盒(ELISA
-
小鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA-sIgE)定量检测试剂盒(ELISA)使用2004-11-27 09:40:25
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。小鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA-sIgE)定量检测试剂盒(EL
人骨成型蛋白7 (BMP-7)ELISA试剂盒说明书
-
您可能感兴趣
![](https://static.yiqi.com/Pingce/img/imgddd.png)
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布,观点仅代表作者本人,不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们立即通知作者,并马上删除。
②凡本网注明"来源:仪器网"的所有作品,版权均属于仪器网,转载时须经本网同意,并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱:hezou_yiqi