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- 【导读】杀稻瘟菌素S(BlasticidinS)现货供应产品简介:BlasticidinS是一种来自Streptomycesgriseochromogenes的核苷类抗生素,通过干扰核糖体...
杀稻瘟菌素S(BlasticidinS)现货供应产品简介:
BlasticidinS是一种来自Streptomycesgriseochromogenes的核苷类抗生素,通过干扰核糖体中肽键的形成来特异性地YZ原核和真核生物的蛋白质合成。BlasticidinS用于筛选携带有bsr或BSD耐受基因的转染细胞。杀稻瘟菌素具有快速而的作用模式,很低的抗生素浓度便能导致细胞迅速死亡。别名:灭稻瘟素货号:B9300CAS:3513-03-9分子式:C17H27CIN8O5分子量:458.9储存条件:-20℃纯度:>95%(HPLC)单位:瓶抗性基因目前已经克隆和测序的杀稻瘟菌素耐受基因有3种,一种是分离自产生菌Streptoverticillumsp.的乙酰基转移酶基因bls,另外两种是脱氨酶基因,包括从Bacilluscereus中分离的bsr和从Aspergillusterreus中分离的BSD基因。Bsr和BSD基因是常用的筛选标志,用于哺乳动物和植物细胞的基因转移实验,也可用于E.Coli。运输与保存方法冰袋(wetice)运输。收到产品后放到-20C保存,有效期至少1年,避免反复冻融。应用浓度1)EscherichiacoliE.coli对BlasticidinS的敏感性稍差,但是转化子对BlasticidinS具有耐受性,可以用低盐LB培养基(pH8)进行筛选,浓度范围为50-100μg/mlBlasticidinS。高pH值可以提高BlasticidinS的活性。2)哺乳动物细胞哺乳动物细胞中BlasticidinS的工作浓度范围在1-50μg/ml。初次实验建议通过灭杀曲线来确定佳使用浓度。-25-100g/mlinbacteria-1-30g/mlinmammaliancells操作步骤(哺乳动物稳转株筛选)BlasticidinS通常使用浓度为10μg/ml。携带bsr或BSD基因的质粒转染到细胞中,在含有BlasticidinS的正常生长培养基中孵育,用于筛选稳定转染细胞株。(1)转染后48h,用含有适宜浓度BlasticidinS的新鲜培养基将细胞传代(注:细胞处于活跃分裂期时抗生素工作好。细胞密度太高,抗生素效率降低。细胞分盘时覆盖率好不超过25%);(2)每3-4天去除培养基,加入含抗生素的新鲜培养基;(3)7天后检测细胞集落形成。根据宿主细胞种类和转染/筛选效率,集落形成可能需要增加一周或更久。(4)转移5-10个耐受克隆到35mm细胞盘中,加入选择培养基维持培养7天。随后用细胞毒性实验进行检测。相关产品K8160Keyholelimpethemocyanin血蓝蛋白Sigma10mg瓶
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