大鼠骨钙素（OC）酶联免疫分析elisa试剂盒使用说明书

公司是一家技术服务型渠道企业,在行业发展中所承担的角色是一种沟通产出方和需求方（科研和市场）的媒介，我们致力为行业人才提供了包括科研在内的更多出口，为科研提供了有力的硬件支持，有效地促进科研和市场需求结合，提高了科研成果的转化效率，使得科研更具活力。

使用目的：
本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中骨钙素（OC）含量。
elisa试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠骨钙素（OC）水平。用纯化的大鼠骨钙素（OC）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入骨钙素（OC），再与HRP标记的骨钙素（OC）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠骨钙素（OC）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠骨钙素（OC）浓度。 
elisa试剂盒组成 
120倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液3ml×1瓶
2酶标试剂3ml×1瓶8标准品（3200ng/L）0.5ml×1瓶
3酶标包被板12孔×4条9标准品稀释液1.5ml×1瓶
4样品稀释液3ml×1瓶10说明书1份
5显色剂A液3ml×1瓶11封板膜2张 
6显色剂B液3ml×1/瓶12密封袋1个
标本要求 
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
elisa试剂盒操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
1600ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
800ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
400ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
200ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
100ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 
4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。