elisa酶联免疫吸附实验直接法和间接法优缺点比较

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【导读】因为ELISA酶联免疫吸附实验具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。已成为分析化学领域中的前沿课题，它是一种特殊的试剂分析方法。elisa可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在...

因为ELISA酶联免疫吸附实验具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。已成为分析化学领域中的前沿课题，它是一种特殊的试剂分析方法。

elisa可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂：
（1）固相的KJ素原或抗体,即"免疫吸附剂"(immunosorbent)；
（2）酶标记的抗原或抗体,称为"结合物"(conjugate)；
（3）酶反应的底物。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不类型的检测方法。
elisa可根据抗原抗体的结合情况来分类为以下两种方法。
直接法（directelisa）
将抗原直接固定在固相载体上，加入酶标记的一级抗体，即可测定抗原总量，此一级抗体的特异性非常重要。
优势：操作手续简短，因无须使用二抗可避免交互反应。
缺点：试验中的一抗都得用酶标记，但不是每种抗体都适合做标记，费用相对提高。
间接法（indirectelisa）
此测定方法与直接法类似，差别在于一级抗体没有酶标记，改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
优势：二抗可以加强信号，而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它Z多的免疫反应性。
缺点：交互反应发生的机率较高。

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2004-08-30 09:23:16

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