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探针法絮状支原体实时定量PCR试剂盒

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产品特点

探针法实时定量PCR检测絮状支原体

详细介绍

探针法絮状支原体实时定量PCR试剂盒

Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma Flocculare

 

货号:Mqt-flo-20      规格:20个反应

货号:Mqt-flo-50      规格:50个反应

货号:Mqt-flo-100     规格:100个反应

储存:-20度,避光保存,有效期一年。避免反复冻融。

 

试剂盒特点:

1,  特异性检测絮状支原体,与其他生物基因组无交叉反应。

2,  灵敏度高,most低检测极限为反应液中80个拷贝。

3,  使用的DNA聚合酶具有抗抑inhibit制能力强和热稳定性好的特点;采用热启动方式,可抑inhibit制非特异性扩增,降低背景荧光。

4,  带有阳性对照样品(组分C),可用于检验试剂盒有效性。

5,  带有UDG酶和dUTP,可降低残留DNA的污染。

 

絮状支原体(Mycoplasma Flocculare)是猪呼吸道粘膜的共生菌,在肺和鼻腔均可发现,根据抗原组合物和基因组分析判断,和猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)亲缘关系非常近,常对其检测造成干扰。猪肺炎支原体是猪的地方性肺炎的病原体,而絮状支原体一般是非致病性的,可能是粘附在纤毛上皮细胞上,但不破坏细胞,在猪肺炎支原体侵袭机体时有时造成机会感染。这两种支原体有着与大多数支原体不同的特征,即很难培养和在固体培养基上的菌落外观不是典型的“煎蛋”样子。絮状支原体大小和形状不是固定不变的,特别是在生长后期。在生长稳定和趋向下降阶段,可发现细丝状细胞,这种细胞形状在猪肺炎支原体中不存在。

由于絮状支原体不引起疾病,虽然在猪群中分布广泛,但检测方法很少,主要还是体外培养法,耗时较长。使用PCR法可以对絮状支原体进行检测,有速度快、特异性强、灵敏度高的优势,仅需几个小时即可获得结果。普通PCR实验操作较为繁琐,只能对目标DNA进行定性分析,相比之下,实时定量PCR不仅可以对目标DNA进行定量分析,实验步骤也较为简单,且灵敏度更高,更少受环境污染的影响。

探针法絮状支原体定量PCR试剂盒选取一个膜转运蛋白基因作为靶点,经BLAST验证,特异性靶向絮状支原体,与其他生物基因组无交叉反应。使用本试剂盒检测了亲缘关系或分布范围较近的24种支原体(包括猪肺炎支原体)和10种细菌,只有絮状支原体可以产生特异性信号,其余均无交叉反应发生。对141个样品进行检测,得到25个阳性,与普通PCR法检测结果完全一致。

 

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