四级生物安全实验室标准操作的要求

　　四级生物安全实验室按照BSL-4标准建造的实验室，也称为高度安全生物实验室。为防止微生物传播和污染环境，BSL-4实验室必须实施特殊的设计和工艺。实验室为独立的建筑物，或在建筑物内一切其它区域相隔离的可控制的区域。除了BSL-3要求的各条标准在BSL-4中都应做到，其具体的标准微生物操作、特殊操作要求如下：

1 四级生物安全实验室标准微生物操作

　　(1)限制进入实验室的人员数量。

　　(2)制定安全操作利器的规程。

　　(3)减少或避免气溶胶发生。

　　(4)工作台面每天至少消毒一次，任何溅出物都要及时消毒。

　　(5)一切废弃物在处理前要高压灭菌。

　　(6)昆虫和啮齿类动物控制按有关规定执行。

　　(7)严格控制菌、毒种(见前)。

2 四级生物安全实验室特殊操作

　　(1)负责人职责

　　实验室负责人有责任保证，在BSL-4内工作之前，所有工作人员已经高度熟练掌握标准微生物操作技术、特殊操作和设施运转的特殊技能。这包括实验室负责人和具有丰富的安全微生物操作和工作经验专家培训时所提供的内容和安全委员会的要求。

　　(2)人员进入

　　只有工作需要的人员和设备运转需要的人员经过系统的生物安全培训，并经过批准后方能进入实验室。负责人或监督人有责任慎重处理每一个情况，确定进入实验室工作的人员。采用门禁系统限制人员进入。进入人员由实验室负责人、安全控制员管理。人员进入前要告知他们潜在的生物危险，教会他们使用安全装置。工作人员要遵守实验室进出程序。制定应对紧急事件切实可行的对策和预案。

　　(3)危害警告

　　当实验室内有传染性材料或感染动物时，在所有的入口门上展示危险标志和普遍防御信号，说明微生物的种类、实验室负责人和其他责任人的名单和进入此区域特殊的要求。

　　(4)免疫接种

　　工作人员要接受试验病原体或实验室内潜在病原微生物的免疫注射。

　　(a)与实验无关的物品(植物、动物和衣物)不许进入实验室。

　　(b)安全手册：制定生物安全手册。告知工作人员特殊的生物危险，要求他们认真阅读并在实际工作当中严格执行。

　　(c)紧急通道只有在紧急情况下才能经过气闸门进出实验室。实验室内要有紧急通道的明显标识。

　　(d)血清学监督：对实验室所有工作人员和其他有感染危险的人员采集本底血清并保存，再根据操作情况和实验室功能不定期血样采集。进行血清学监督。对致病微生物抗体评价方法要注意适用性。项目进行中，要保证每个阶段血清样本的检测，并把结果通知本人。

　　(e)实验材料和用品要通过双扉高压灭菌器、熏蒸消毒室或传递窗送入，每次使用前后对这些传递室进行适当消毒。

　　(f)在安全柜型实验室中，工作人员的衣服在外更衣室脱下保存。穿上全套的实验服装(包括外衣、裤子、内衣或者连衣裤、鞋、手套)后进入。在离开实验室进入淋浴间之前，在内更衣室脱下实验服装。服装洗前应高压灭菌。在防护服型实验室中，工作人员必须穿正压防护服方可进入。离开时，必须进入消毒淋浴间消毒。

　　(g)对利器，包括针头、注射器、玻璃片、吸管、毛吸管和解剖刀，必须采取高度有效的防范措施。尽量不使用针头、注射器和其它锐利的器具。只有在必要时，如实质器官的注射、静脉切开或从动物体内和瓶子里吸取液体时才能使用，尽量用塑料制品代替玻璃制品。在注射和抽取传染性材料时，只能使用锁定针头的或一次性的注射器(针头与注射器一体的)。使用过的针头在处理之前，不能折弯、折断、破损，要精心操作，不要盖上原来的针头帽;放在固定方便且不会刺破的用于处理利器的容器里。不能处理的利器，必须放在器壁坚硬的容器内，运输到消毒区，高压消毒灭菌。可以使用套管针管和套管针头、无针头注射器和其它安全器具。破损的玻璃不能用手直接操作，必须用机械的方法清除，如刷子、簸萁、夹子和镊子。盛污染针头、锐利器具、碎玻璃等，在处理前一律消毒，消毒后处理按照国家或地方的有关规定实施。

　　(h)建立报告实验室暴露事故、雇员缺勤制度和系统，以便对与生物实验室潜在危险相关的疾病进行医学监督。对该系统要建造一个病房或观察室，以便需要时，检疫、隔离、ZL与实验室相关的病人。

　　(i)技术培训：工作人员必须经过操作Z危险病原微生物的全面培训，建立普遍防御意识，学会对暴露危害的评价方法，学习物理防护设备和设施的设计原理和特点。每年训练一次，规程一旦修改要增加训练次数。由对这些病原微生物工作受过严格训练和具有丰富工作经验的专家或安全委员会指导、监督进行工作。

　　(j)传染性材料溅出的消毒清洁工作，由适宜的专业人员进行。并将事故的经过在实验室内公示。

　　(k)从BSL-4拿出活的或原封不动的材料时，先将其放在坚固密封的一级容器内，再密封在不能破损的二级容器里，经过消毒剂浸泡或消毒熏蒸后通过专用气闸取出。

　　(l)除活体或原封不动的生物材料以外的物品，除非经过消毒灭菌，否则不能从BSL-4拿出。不耐高热和蒸汽的器具物品可在专用消毒通道或小室内用熏蒸消毒。

　　(m)完成传染性材料工作之后，特别是有传染性材料溢出、溅出或污染时，都要严格彻底地灭菌。实验室内仪器要进行常规消毒。