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盐析曲线制作
上海飞轩生物科技有限公司更新于：2013-04-09

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盐析曲线制作如果要分离一种新的蛋白质和酶，没有文献数据可以借鉴，则应先确定沉淀该物质的硫酸铵饱和度具体操作方法如下：取已定量测定蛋白质或酶的活性与浓度的待分离样品溶液，冷至0～5，调至该蛋白质稳定的pH值，分6～10次分别加入不同量的硫酸铵，**次加硫酸铵至蛋白质溶液刚开始出现沉淀时，记下所加硫酸铵的量，这是盐析曲线的起点继续加硫酸铵至溶液微微混浊时，静止一段时间，离心得到**个沉淀级分，然后取上清再加至混浊，离心得到第二个级分，如此连续可得到6～10个级分，按照每次加入硫酸铵的量，查出相应的硫酸铵饱和度将每一级分沉淀物分别溶解在一定体积的适宜的pH缓冲液中，测定其蛋白质含量和酶活力以每个级分的蛋白质含量和酶活力对硫酸铵饱和度作图，即可得到盐析曲线

内容节点: 概述; 实验/设备条件; 样品提取; 实验/操作方法; 实验结果/结论; 仪器/耗材清单

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