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一、样品提取 

准确称取均质后的猪肉 3.0 g 于 50 mL 离心管中，加入 0.1  mol/L 的 EDTA-Mcllvaine 溶液 15 mL，漩涡摇匀 1 min，冰水浴 超声 10 min，控制样品温度 <15℃；5000 r/min 离心 8 min。取 上清液，重复提取一次，合并清液、快速滤纸过滤，备用。 

二、SPE 柱净化（Copure® HLB，60 mg/3 mL） 

活化：HLB 固相萃取柱使用前用 3 mL 甲醇、3 mL 水活化。 

上样和洗脱：在 HLB 固相萃取柱上加入 10 mL 备用样液，弃 去流出液，用 3 mL 5%甲醇水溶液淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱； 用 8 mL甲醇 -乙酸乙酯溶液（1:9, v/v）洗脱，收集洗脱液（整 个上样、洗脱过程保持流速 2 mL/min）。 

重新溶解：洗脱液 40℃氮吹吹干，1 mL 甲醇定容，过 0.45  µm 滤膜，上机测试。 

三、仪器条件

设 备：Waters Alliance 2695 色谱柱 ：XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器 ：Waters 2487 紫外检测器 检测波长：270 nm 流动相 ：A：乙腈   B：0.1% 甲酸水溶液 洗脱方式：梯度洗脱，见表 1 

表 1 流动相梯度洗脱条件